骆海波，李世升，李德超，贺从安

（武汉市蔬菜科学研究所，430065）

短叶13号萝卜加代技术研究

骆海波，李世升，李德超，贺从安

（武汉市蔬菜科学研究所，430065）

通过低温处理萝卜干种子、萌动种子及幼苗，以期从中筛选出更适合短叶13号萝卜加代研究的材料，寻找更快、更方便的萝卜加代方法。试验结果表明，相比其他两类材料，萝卜干种子不易完成春化而开花；而在萝卜萌动种子及萝卜幼苗两类材料中，前者加代操作相对简便且低温处理定植后开花比例较高。因此，将萌动种子作为萝卜加代材料可缩短育种进程、提高育种效率。

春化；加代；发育时期；开花；短叶13号萝卜

萝卜是种子春化型作物，低温是其开花的必要条件。自然低温条件需要较长时间才能实现，因此利用自然条件让萝卜开花结实周期长、耗时多。利用人工条件模拟自然低温促进萝卜提早开花，可大大缩短研究时间，加快萝卜育种进程[1]。加代技术是利用二年生作物低温春化的植物学习性，通过低温处理或激素处理幼苗，人为促进植物抽薹、开花及结籽的技术，每年至少可完成2～4代。本研究在先前萝卜人工加代技术的基础上[2]，利用恒定低温条件处理干种子、萌动种子及幼苗等不同时期的短叶13号常规萝卜材料，通过比较上述不同萝卜材料经人工低温处理后开花情况及种子形成情况，筛选更方便、快捷的萝卜加代方法。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料来自武汉市蔬菜研究所十字花科研究室纯化的短叶13号常规萝卜品种。

1.2 试验方法

分别对短叶13号萝卜品种的3个不同发育时期（处于休眠状态干种子、萌动种子及处于子叶时期幼苗）的材料进行处理。干种子直接放置于2～4℃冰箱进行低温处理；另外将短叶13号干种子放入玻璃平皿浸种，分别将浸种2 d左右刚露白萌动的种子及浸种7 d已发育至子叶期的幼苗移入装有有机基质的穴盘中，并置于2～4℃冰箱进行低温处理，均处理20 d。每个材料设置3个重复，处理期间需要人工浇水以保持适当湿度，待处理完后直接移苗于露地，作好标记，具体操作过程如图1。田间调查每个处理的定植时间、开花时间、花器官形态及结荚情况等。

图1 萝卜加代过程

表1 不同类型萝卜材料开花比例统计

1.3 萝卜胚胎分离及花药观察

手工从萝卜角果中分离胚珠，然后再利用解剖针在解剖镜（江南JSZ5B）下分离得到萝卜不同发育时期的胚胎，花药形态及萝卜胚胎利用体式显微镜（Olympus SCX-12）及CCD观察并拍照。

1.4 数据统计及制图

数据获取后利用Excel进行描述性统计分析，然后利用Coreldraw12作图。

图2 低温处理后短叶13号萝卜开花情况

2 结果与分析

图3 短叶13号萝卜荚果及种子胚胎发育情况

2.1 不同萝卜材料开花情况比较

表1结果表明，除萝卜干种子开花比例极低（0.54%，n=402）外，其他2类材料开花比例均较高，人工低温处理萝卜萌动种子及萝卜幼苗定植后开花比例分别为91.72%（n=95）、95.85%（n=120）。尽管萝卜干种子经人工低温处理后开花比例较低，但其操作简单（直接将其放置低温冰箱即可）。另外，相比萝卜幼苗的加代过程，萝卜萌动种子的加代步骤也比较简单，只需要将刚刚萌动的种子放入穴盘进行低温处理。处理萝卜幼苗则需将其人工插入穴盘基质，加之移苗过程易折断下胚轴致其倒伏。

2.2 不同萝卜材料开花后花器官形态比较

通过比较发现，萝卜干种子、萝卜萌动种子及萝卜幼苗经低温处理后所形成的生殖器官——花在外形上不存在差异。3种萝卜材料经加代后花器官一致，部分雄性不育植株花形态中雄蕊败育情况也十分明显（图2）。

2.3 不同萝卜材料开花后角果发育及胚胎发育情况分析

图3为短叶13号萝卜荚果及种子胚胎发育情况，本试验结果表明，3种萝卜材料在人工加代开花（可育植株）后均能形成正常角果，加代后所形成的角果与自然条件下所形成角果无异。进一步通过显微解剖的方法分离得到不同发育时期内胚珠中的胚胎，结果显示胚胎发育也是正常的。

3 小结与讨论

萝卜加代技术不仅为研究萝卜育性、萝卜重要性状遗传及种子发育规律提供可贵试验材料，而且使其研究过程大大缩短，研究速度加快。通过人工低温处理萝卜种子使其完成开花在前人研究中已见报道[3，4]，本研究希望通过筛选不同萝卜材料，寻找更快、更方便的萝卜加代方法。萝卜干种子、萝卜萌动种子及萝卜幼苗分别是不同状态的种子及其发育产物，分别对上述萝卜材料开展人工低温处理工作并分析其开花情况，结果表明，相比其他2种材料，萝卜干种子在相同条件下不易完成春化而开花。而在萝卜萌动种子及萝卜幼苗两类材料中，前者加代操作相对简便且低温处理定植后开花比例较高。总而言之，将萝卜萌动种子作为萝卜加代材料可使萝卜加代过程更快、更便捷，效率也很高。

[1]汪隆植，何启伟.中国萝卜[M].北京：科学技术文献出版社，2004：22-34.

[2]梅时勇.系统开展萝卜全产业链科技研发 促进我们萝卜产业不断提档升级[J].长江蔬菜，2013（24）：1-5.

[3]张丽，宫国义.两种春化方式对不同萝卜品种抽薹开花的影响[J].北方园艺，2006（2）：35-36.

[4]骆海波，张雪清，李德超，等.萝卜加代技术[J].种子世界，2004（12）：46.

Study on Generation-adding Technology for Duanye No.13 Radish

LUO Haibo,LI Shisheng,LI Dechao,HE Cong'an
(Wuhan Vegetable Research Institute,430065)

In the paper,we treated radish dry seeds,germinated seeds and seedlings in low temperature respectively,in order to screen out suitable generation-adding material for Duanye No.13 radish and find out faster,more convenient generation-adding method for radish.The results showed that,compared with the other two materials,dry radish seeds could not flower after the cold temperature treatment.After being treated in low temperature,germinated radish seeds had higher flowering ratio and it was easier and more simple to take germinated seeds as generation-adding materials for radish.As a result,taking germinated seeds as generation-adding materials for radish could shorten the breeding process and improve the breeding efficiency of radish.

Vernalization;Generation adding;Developmental stage;Flowering;Duanye No.13 radish

S631.1

A

1001-3547（2014）08-0015-03

10.3865/j.issn.1001-3547.2014.08.005

武汉市科技局攻关项目（项目编号：CX2013021702010584）

骆海波（1970-），男，本科，高级农艺师，主要从事萝卜育种研究

李德超（1965-），男，通信作者，正高级农艺师，主要从事萝卜育种及推广工作，E-mail：121906411@qq.com

2013-07-16