丝裂霉素C对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β和Smads表达的影响
2013-11-11吴晓明张鸿霞许新华王鹤鹏杨景哲李树松
孙 奎,吴晓明,张鸿霞,许新华,王鹤鹏,杨景哲,李树松
(承德医学院附属医院烧伤整形外科,河北承德067000)
瘢痕疙瘩是皮肤损伤后伤口愈合过程中出现成纤维细胞过度增殖、胶原大量沉积,也是皮肤损伤后组织异常修复的结果。目前,对瘢痕发生的机制仍知之甚少,因而临床上亦远未找到切实有效的防治措施。瘢痕疙瘩多采用局部药物注射、压迫治疗、手术和激光治疗等进行综合治疗,但效果不是很理想,因而瘢痕疙瘩也成了当今整形外科领域的一个研究热点和难点[1]。现将丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)对瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblast,KFB)转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smads通路作用及机制报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择2009年6月至2010年6月本院收治的瘢痕疙瘩进行整形手术的患者13例,其中,男9例,女4例;年龄12~46岁。取材部位:上肢5例,面部3例,躯干5例。入选标准为病程短且生长活跃的瘢痕疙瘩组织,未接受任何抑制瘢痕增生的治疗,均无系统性疾病史,且对所取组织均知情同意。
1.2 标本的制作 将手术切下的瘢痕疙瘩组织采用组织块贴壁培养法进行体外培养。在无菌条件下切除表皮及皮下脂肪,将标本制成1 mm3左右的组织块,置于培养瓶中,在95%空气、5%CO2、37℃、饱和湿度条件下培养8~12 h。然后加入含15%胎牛血清的达氏修正依氏培养基(Dulbecco′s modified eagle′s medium,DMEM)适量,继续培养,3~4 d换液1次。2~3周后,原代细胞生长成单层,用0.25%胰蛋白酶消化后,按1∶3的比例传代培养。常规培养KFB 24 h后,吸去培养液和未贴壁细胞,更换含不同药物浓度的培养液,实验分为对照组和MMC干预组,正常对照组用DMEM培养液;……
