田雅军 王立君 赵 鹏 张 煜 范 震

1.南京军区杭州疗养院门诊部，浙江杭州 310007；2.杭州市第一医院，浙江杭州 310006

结直肠癌是消化系统的常见肿瘤，近年来发病率呈逐年上升趋势，其发生、发展和传播、转移是一个多因素共同作用的复杂过程。血管内皮生长因子（VEGF）被认为是促进肿瘤血管生成最重要的调节因子，可诱导瘤内或瘤周的淋巴管及血管生成及扩张[1]。NO具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用，在肿瘤的转移、复发、侵袭过程中发挥重要作用。本组研究分析VEGF和NO在结直肠癌中的表达水平，并探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2010年1月～2012年1月南京军区杭州疗养院和杭州市第一医院收治的55例结直肠癌患者，均经病理检查确诊。其中，男31例，女24例；年龄33～72岁，平均（47.3±2.8）岁；直肠癌33例，结肠癌22例；TNM分期（2009年国际抗癌联盟标准）：Ⅰ期7例，Ⅱ期11例，Ⅲ期20例，Ⅳ期17例；低、未分化腺癌20例，高、中分化腺癌35例；无淋巴结转移24例，有淋巴结转移31例；术后复发14例，未复发41例。排除标准：术前接受放疗或化疗治疗患者。选取同期正常健康人群34例，其中，男18例，女16例；年龄31～70岁，平均（44.6±2.4）岁。 将 55 例结直肠癌患者设为观察组，34例正常健康体检人群设为对照组。

1.2 方法

两组患者均晨起抽取空腹静脉血2 mL，于4℃下以3 000 r/min离心10 min，分离出血清置于-70℃冰箱中保存待测。VEGF采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测，试剂盒购自美国RD公司。NO应用分光光度计法检测，试剂盒购自上海研吉生物科技有限公司。均严格按试剂盒规定操作，检测VEGF、NO水平。

1.3 统计学方法

使用SPSS 17.0软件进行统计分析，计量资料符合正态分布以均数±标准差（±s）表示，组间均数比较采用成组设计的t检验，计数资料比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组VEGF、NO水平比较

观察组VEGF、NO水平均显著低于对照组，两组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组血管内皮生长因子和一氧化氮水平比较（±s）

表1 两组血管内皮生长因子和一氧化氮水平比较（±s）

组别 例数 VEGF（ng/L） NO（μmol/L）观察组对照组55 34 t值 P值384.6±42.4 137.2±26.1 2.163＜0.05 77.9±11.7 40.5±9.3 2.085＜0.05

2.2 VEGF、NO阳性表达与肿瘤大小、部位、分期、复发比较

VEGF、NO阳性表达与肿瘤大小、部位比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。肿瘤分期、复发与VEGF、NO阳性表达比较，差异有统计学意义（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01）。

表2 血管内皮生长因子和一氧化氮阳性表达与肿瘤大小、部位、分期、复发比较[n（%）]

3 讨论

结直肠癌是临床常见的消化系统肿瘤，其最显著的生物学特征是侵袭与转移，癌症的传播、转移、复发严重影响结直肠癌患者的生存期，术后生存率较低，严重威胁人类的健康。结直肠癌是一个多因素、多步骤、多途径的复杂过程，包括细胞的增殖、凋亡的抑制、肿瘤基质和肿瘤周围血管的形成等多个方面，此过程又受到多种因素的调控。近年屡有报道VEGF的异常表达与结直肠癌的发病相关，但是关于NO与结直肠癌的关系相关的研究较少，本组研究分析了VEGF和NO表达与结直肠癌的关系。

VEGF特异性作用于血管内皮细胞，为内皮细胞特异的有丝分裂源，在内皮细胞的增殖、迁移和血管构建中起着重要的作用，是一种血管渗透剂。恶性肿瘤增殖扩散的各个阶段均有新生血管生成。VEGF阻止血管内皮细胞管腔网状结构退化和细胞凋亡，促进血管内皮细胞变形、移动、分裂和增殖，增强血管通透性和血管新生，形成新的肿瘤供血血管网，是一种明确的血管形成及血管通透性诱导因子，在许多新生血管形成中起关键作用，与肿瘤转移及预后相关。许多体液因子及肿瘤基因都是通过调节VEGF而促进或抑制肿瘤血管生成。VEGF在刺激血管生成的同时，还具有增加微小血管通透性、促进内皮细胞增殖迁移、促进基质降解等机制促进肿瘤最终导致肿瘤病灶新生血管形成，病灶浸润、增殖和转移，与直肠癌淋巴结转移关系密切[2-3]，是目前发现的最重要的肿瘤血管生长因子。近年不仅应用于临床肿瘤发生、发展的检测，同时也可作为放疗效果预测指标[4]。

NO是神经元释放的血管活性因子，也可由胃肠、脑、心、肝、肾等脏器的组织细胞产生，具有舒张血管的作用，可以松弛血管平滑肌抑制其细胞增殖，改善血管紧张度，调节血流、抑制血小板的聚集和白细胞的激活[5]，其水平可反映脏器血液循环状态和生理功能情况。肿瘤患者本身存在缺血、缺氧、免疫力低下状态。NO在组织中的浓度异常降低后，可介导活化的巨噬细胞杀伤肿瘤细胞，促进内皮细胞的黏附，导致细胞凋亡及DNA损伤，增加血管通透性，促进肿瘤血管形成，在机体正常组织免疫力低下、缺氧、缺血的状态下加速肿瘤的生长和转移。结直肠癌患者血清中NO含量发生异常改变，可能与肿瘤细胞大量增殖，代偿性产生大量代谢产物释放入血有关，导致机体抗肿瘤能力降低，诱导肿瘤细胞凋亡，同时对肿瘤的侵袭、复发、转移起到一定的作用[6]。

本组研究表明在结直肠癌中VEGF、NO均为高表达，认为二者可以作为结肠癌检测时的预测因子，而且VEGF、NO阳性率可以反映肿瘤分期与复发情况。本组研究表明TNM分期Ⅳ期时，VEGF、NO阳性率的表达均最低，其机制有待于进一步研究。术后复发组织中，其阳性率显著升高，表明VEGF、NO阳性率表达有可能作为是否复发的指标。本组没有考察VEGF、NO两个因子在结直肠癌表达的相关性。但临床研究表明VEGF可通过细胞内钙调蛋白及磷酸肌醇途径影响NO的形成[7]，而NO参与VEGF诱导的肿瘤血管形成的内皮细胞移动、溶解基质和复发。因此，二者可能在结直肠癌组织中表达具有一定的相关性，尚需下一步研究与探讨。

[1]Boere IA，Hamberg P，Sleijfer S.It takes two to tango：combinations of conventional cytotoxics with compounds targeting the vascular endothelial growth factor-vascular endothelial growth factor receptor pathway inpatients with solid malignancies[J].Cancer Sci，2010，101（1）：7-15.

[2]刘涛，张超，吕伟，等.VEGF-C在直肠癌中的表达及其意义[J].重庆医学，2009，38（5）：509-511.

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