詹 阳 梁 鑫 谷玉春 朱 力

首都医科大学附属北京妇产医院病理科，北京 100006

卵巢上皮性癌（epithelial ovarian carcinoma，EOC）是女性生殖器官发病率列居第三位的肿瘤，但病死率却为首位，其五年生存率仅为25%～30%。目前卵巢上皮性癌治疗效果不显，寻找新的分子靶点，以提高患者生存率仍然是妇科肿瘤学者们亟待解决的问题。HER2/neu/erbB2是表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）家族成员之一，在许多肿瘤中的过表达和（或）突变，与许多肿瘤发生发展及预后密切相关。以HER2为肿瘤靶向，采用独立或联合传统的药物治疗在乳腺癌、胃癌等已取得了一定的效果[1-2]。针对HER2在卵巢癌中的靶向治疗，国外处于小样本的临床试验阶段[3-5]。本研究的目的是观察中国人群大样本卵巢上皮性癌病例中HER2蛋白过表达状态，并分析其临床病理意义，为今后治疗提供基础数据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2008～2012年我院卵巢上皮性肿瘤病理标本322例，其中，卵巢上皮性癌242例，交界性上皮性肿瘤65例，良性上皮性肿瘤15例。所有患者术前均未接受过放疗、化疗或激素治疗。初次手术方式为卵巢癌分期手术或肿瘤细胞减灭术，并收集相关临床病理参数。

1.2 标本制作和免疫组化染色

所有标本均用中性福尔马林固定并石蜡包埋，4 μm厚切片。HER2抗体购自DAKO公司的A0485多抗；雌激素受体（ER，克隆号：1D5）和孕激素受体（PR，克隆号：Y85）购自于GENEMED Biotechnologies公司。ER、PR和HER2的工作浓度分别为 1∶120、1∶100 和 1∶450。 采用免疫组化二步法测定卵巢上皮性肿瘤中HER2、ER和PR的表达情况。

1.3 结果判断标准

免疫组化中HER2蛋白在全部瘤细胞中均无染色或＜10%瘤细胞染色者结果为0；瘤细胞＞10%细胞膜不完整弱染色者结果为1+；瘤细胞＞10%细胞膜轻度至中度完整染色者结果为2+；瘤细胞＞10%细胞膜完整染色者结果为3+；0～1+为阴性，2+～3+为阳性，即过表达（图1～4）。 ER 和PR阳性为肿瘤细胞中细胞核着色≥10%。ER和PR任意一种受体阳性为激素受体（hormonal receptor，HR）阳性；ER和PR均阴性，为HR阴性。

1.4 统计学方法

本研究采用SAS 9.1软件进行统计分析。计数资料采用百分率表示，HER2蛋白在良性、交界、恶性卵巢上皮性肿瘤组织中表达差异及其与临床病理参数的关系，组间对比采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

表1 242例卵巢上皮性癌患者的临床病理特征与HER2蛋白过表达[n（%）]

2 结果

2.1 临床病理资料

242例卵巢上皮性癌患者平均年龄为51.6岁，近80%在40～65岁范围。65例交界性卵巢上皮性肿瘤患者的平均年龄为38.9岁，较恶性肿瘤患者平均年轻10岁。242例卵巢上皮性癌患者的临床病理资料见表1。

2.2 HER2在卵巢上皮性肿瘤中的表达

HER2在卵巢良性、交界性和恶性的上皮性肿瘤的阳性率分别为 0、21.54%（14/65）以及 16.12%（39/242），在卵巢交界性及恶性中的阳性表达显著高于良性肿瘤，但交界性和恶性肿瘤间表达差异无统计学意义。卵巢上皮性癌中HER2在激素受体表达、组织学分型和组织学分级中的各组表达率差异有统计学意义；HER2表达与FIGO分期、患者年龄、淋巴结转移以及肿瘤发生侧别无关（表1）。卵巢交界性肿瘤的组织亚型有浆液性肿瘤40例，HER2过表达为11例（27.5%）；黏液性肿瘤22例，其过表达为2例（9.09%）；子宫内膜样交界性肿瘤为3例，其过表达1例（33.33%）。

2.3 HER2在卵巢透明细胞腺癌中的表达

HER2在卵巢透明细胞腺癌表达较其他组织学分型均高，为 42.11%（16/38）（表1），其患者平均年龄 51.1 岁。透明细胞腺癌FIGO分期分别为Ⅰ期67.5%，Ⅱ期10.0%，Ⅲ期22.5%。卵巢透明细胞腺癌中激素受体阴性占79.5%，16例HER2阳性透明细胞腺癌中HR阴性为75%。

3 讨论

卵巢上皮性癌是妇科肿瘤中死亡率居首位的肿瘤，目前各种传统治疗方法效果不明显，处于“瓶颈”期，需要新的治疗途径来改善患者的长期生存率和清除耐药肿瘤细胞，因此，个体化靶向治疗愈显重要。

HER2是一种原癌基因，控制细胞增殖和能动性，其突变和扩增已被发现和许多肿瘤相关，如乳腺、卵巢、肺、前列腺和结肠癌[6]。它启动一系列信号转导通路（包括MAPK和 PI3K-Akt通路等），介导细胞的增殖、分化、抗凋亡等过程。针对HER2蛋白的药物主要有抗HER2蛋白抗体、酪氨酸激酶抑制剂和肽疫苗等。针对HER2的肿瘤靶向药物在卵巢癌中多还处于临床实验阶段，样本量不大，部分取得了一定的效果[3-5]。国内HER2在卵巢癌中的表达的大样本量研究不多，未见其相应药物治疗的报道。了解中国人中HER2过表达状况，为今后可能的靶向治疗提供基础依据。

近年来国外大宗病例研究HER2在卵巢癌中表达的结果总结，结论不尽相同，范围为5%～35%[7-12]；而国内的研究结果阳性率多高于这一比例。本研究中HER2蛋白在卵巢上皮性癌中的表达较低，多数为“1+”，242例卵巢上皮性癌中其过表达率为16.17%，与国外文献一致。HER2在卵巢癌中表达结果差异大的原因可能与不同实验室、种族、肿瘤临床病理分期评定标准、HER2阳性评定标准以及小样本量等相关；另外，卵巢上皮性癌中各组织亚型间表达的差异，以及样本量中各型比例的差异可能是导致HER2在卵巢上皮性癌中表达有差异重要原因之一。HER2在卵巢上皮性癌和卵巢交界性肿瘤中均有表达，但由于交界性肿瘤数量少，仅有三种组织学分型，无法进行统计学分析，有待于今后增大样本量再行分析。

卵巢上皮性癌是由一组异质性肿瘤，目前肿瘤治疗主要是取决于肿瘤的分期、分级，而不是组织分型。近年来研究发现不同的组织分型不仅是形态学的差异，从分子遗传学就有其各自特点，表现不同的生物学行为和预后[13]，所以与之相应的治疗方式亦具有差异。本研究中HER2蛋白过表达在常见的四种卵巢上皮性癌组织学亚型（浆液性、黏液性、子宫内膜样和透明细胞腺癌），以及其他少见上皮性癌中的各组表达差异具有统计学意义。四种常见卵巢上皮性癌中，卵巢子宫内膜样腺癌表达最低，为5.41%，而透明细胞癌中表达最高，为42.11%。HER2在卵巢上皮性癌各分型表达的差异，一定程度说明了肿瘤发生的分子机制差异，同时也提示了针对HER2蛋白的靶向药物使用是应该具有选择性。

卵巢透明细胞腺癌可能起源于宫颈内膜腺上皮或是子宫内膜异位病灶[14]，由于其常伴发子宫内膜异位，高发的化疗耐药和预后差的特殊临床特征区使其别于其他卵巢上皮性癌。卵巢透明细胞腺癌目前属Ⅰ型卵巢癌，但较同期浆液性腺癌生存率低，目前关于肿瘤细胞的排列方式、细胞类型、分裂指数、核的分级是否可以做为预后的判断指标，尚无统一意见。文献中HER2在卵巢透明细胞腺癌中表达的研究结果也不尽相同，国内还未见相应多量病例的报道。本研究中透明细胞腺癌HER2过表达远高于其他亚型，HER2的高表达是否提示给透明细胞腺癌这一高耐药、预后差的肿瘤治疗带来新的契机，有待于进一步研究。本研究中未发现卵巢透明细胞腺癌中HER2蛋白过表达在各项临床病理参数中的统计学差异，这可能与样本量不大有关，这将是我们今后研究的一个方向。

HER2蛋白表达与多种肿瘤的不良预后有关[15-18]，文献中对HER2在卵巢癌的研究结果不一致。本研究结果显示卵巢上皮性癌中HER2过表达病例中，激素受体表达各组差异有统计学意义，激素受体阴性的比例较高。乳腺癌中HER2与激素受体（ER、PR）的表达对肿瘤的治疗和预后都密切相关。卵巢上皮性癌中HER2过表达，同时ER、PR阴性是否和乳腺癌相似，为预后不良的表现还不得而知。同时，本研究结果显示了HER2过表达与FIGO分期以及淋巴结是否转移无关。在组织学分级中HER2过表达虽然在各组中差异有统计学意义，但并未表现为组织分化高低与HER2过表达的相关性，而在交界性肿瘤也可见HER2表达，可能是HER2在肿瘤细胞的分化中作用不大，或是由于各组间病例数不均衡造成。以上结果表明就卵巢上皮性癌而言，HER2可能不是影响预后的独立危险因子。

HER2在各型卵巢上皮性癌中有一定表达，可能成为卵巢上皮性癌潜在的治疗靶点，其相关药物的独立或联合用药可能为其治疗带来契机。卵巢上皮性癌的各组织学分型中HER2表达有差异，透明细胞腺癌高表达将是我们今后研究的重点。

[1]Maughan KL，Lutterbie MA，Ham PS.Treatmentof breast cancer[J].Am Fam Physician，2010，81（11）：1339-1346.

[2]Lordick F.Trastuzumab：a new treatmentoption for HER2-positive metastatic gastric and gastroesophageal junction cancer [J].Future Oncol，2011，7（2）：187-199.

[3]Makhija S，Amler LC，Glenn D，et al.Clinical activity of gemcitabine plus pertuzumab in platinum-resistant ovarian cancer，fallopian tube cancer，or primary peritoneal cancer[J].J Clin Oncol，2010，28（7）：1215-1223.

[4]Langdon SP，Faratian D，Nagumo Y，et al.Pertuzumab for the treatment of ovarian cancer [J].Expert Opin Biol Ther，2010，10（7）：1113-1120.

[5]Weroha SJ，Oberg AL，Ziegler KL，et al.Phase II trial of lapatinib and topotecan（LapTop） in patients with platinum-refractory/resistant ovarian and primary peritoneal carcinoma [J].GynecolOncol，2011，122（1）：116-120.

[6]Hynes NE，Mac Donald G.ErbB receptors and signaling pathways in cancer[J].Curr Opin Cell Biol，2009，21（2）：177-184.

[7]Nielsen JS，Jakobsen E，Hlund B，et al.Prognostic significance of p53，Her-2 and EGFR overexpression in borderline and epithelial ovarian cancer[J].Int J Gynecol Cancer，2004，14（6）：1086-1096.

[8]Lee CH，Huntsman DG，Cheang MC，et al.Assessment of Her-1，Her-2 and Her-3 expression and Her-2 amplification in advanced stage ovarian carcinoma[J].Int J Gynecol Pathol，2005，24：147-152.

[9]Tuefferd M，Couturier J，Penault-Llorca F，et al.HER2 status in ovarian carcinomas：a multicenter GINECO study of 320 patients[J].PLos One，2007，2（11）：1138.

[10]Pils D，Pinter A，Reibenwein J，et al.In ovarian cancer the prognostic influence of HER2/neu is not dependent on the CXCR4/SDF-1 signalling pathway[J].Br J Cancer，2007，96（3）：485-491.

[11]Steffensen KD，Waldstrm M，Jeppesen U，et al.The prognostic importance of cyclooxygenase 2 and HER2 expression in epithelial ovarian cancer[J].Int J Gynecol Cancer，2007，17（4）：798-807.

[12]Ali-Fehmi R，Chatterjee M，Ionan A，et al.Analysis of the expression of human tumor antigens in ovarian cancer tissues[J].Cancer Biomark，2010，6（1）：33-48.

[13]Mc Cluggage WG.Morphological subtypes of ovarian carcinoma：a review with emphasis on new developments and pathogenesis[J].Pathology，2011，43（5）：420-432.

[14]Nowak-Markwitz E，Spaczyński M.Ovarian cancer--modern approach to its origin and histogenesis[J].Ginekol Pol，2012，83（6）：454-457.

[15]Yoon HH，Shi Q，Sukov WR，et al.Adverse prognostic impact of intratumor heterogeneous HER2 gene amplification in patients with esophageal adenocarcinoma[J].J Clin Oncol，2012，30（32）：3932-3938.

[16]Petrelli F，Barni S.Role of HER2-neu as a prognostic factor for survival and relapse in pT1a-bN0M0 breast cancer：a systematic review of the literature with a pooled-analysis[J].Med Oncol，2012，29（4）：2586-2593.

[17]Xia Q，Zhu Z，Wang J，et al.Expression and association of HER2 with prognosisin early-stage（T1-T2N0M0） non-small cell lung cancer[J].Tumour Biol，2012，33（5）：1719-1725.

[18]Janjigian YY，Werner D，Pauligk C，et al.Prognosisof metastatic gastric and gastroesophageal junction cancerby HER2 status：a European and USA International collaborative analysis[J].Ann Oncol，2012，23（10）：2656-2662.