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黄疸新生儿血清中TORCH特异性抗体的检测意义

2013-10-17陈艳杰

中国医药导报 2013年2期
关键词:风疹病毒黄疸检出率

梅 峻 谷 丽 陈艳杰

同济大学附属第十人民医院儿科,上海 200072

TORCH是一组病原微生物的英文名称缩写,其中TOX是弓形虫,RV是风疹病毒,CMV是巨细胞病毒,HSV是单纯疱疹病毒,HSV又可分为两型,即HSV-Ⅰ型和HSV-Ⅱ型[1]。近年来很多研究表明TORCH感染与新生儿病理性黄疸的发生关系密切,本研究通过对本院住院新生儿感染性黄疸与非黄疸新生儿进行TORCH特异性抗体检测,结果如下:

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院2011年1~4月儿科收治入院的新生儿黄疸100例(新生儿黄疸组),其中男59例,女41例;对照组非黄疸新生儿100例,其中男57例,女43例,新生儿黄疸病例诊断标准参考《实用新生儿学》第3版的诊断标准[2]:①黄疸在出生24 h内出现;②血清总胆红素>205.2 mol/L或每日上升85 mol/L;③黄疸持续时间长(足月儿>2周,早产儿>4周);④黄疸褪而复现。两组新生儿年龄、性别等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 试剂与仪器

各抗原均由中国预防医学科学院病毒研究所提供;羊抗人IgM酶标记物购于中科晨宇生物科技公司,聚乙二醇(PEG)粉剂购自美国陶氏PEG。各种TORCH-IgM阳性及阴性血清标本来自计划生育门诊,试剂盒是上海生物制品公司生产,所有试剂均在有效期内使用。

1.3 标本采集

所有血清标本均采用腹股沟抽血,标本量3 mL,统一用生化管采集,无抗凝剂,送检时间:采集完1 h以内。常规法TORCH-IgM系列诊断试剂由本单位研制,经一系列实验鉴定,符合中国生物制品标准化委员会编写的中国生物制品规程中的酶联诊断试剂的基本要求。

表1 两组住院新生儿TORCH抗体检测结果

1.4 检测方法

血清TORCH抗体的检测方法为酶联免疫吸附法(ELISA),操作步骤严格遵照试剂盒说明书进行,取浓缩洗液稀释后加入20 μL待检标本和阴、阳性对照。每孔加入100 μL酶结合物,37℃反应60 min,洗涤5遍,每孔依次加入底物液50 μL,振荡混匀终止反应。

1.5 判定标准

样品抗体指数=样品吸光度(OD)/临界校正液平均OD,抗体指数≤0.90为阴性,在0.91~0.99范围为可疑,≥1.00为阳性。

1.6 统计学方法

本研究所有资料均有同一个人录入,并由同一人负责核实,确保所有资料的准确无误。采用统计软件SPSS 16.0对实验数据进行分析,计数资料以率表示,采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

本研究两组中200例新生儿,IgM抗体阳性34例,阳性率17.0%。新生儿黄疸组100例中,TORCH-IgM阳性31例,IgM抗体检出率31.0%,对照组100例中TORCH-IgM阳性3例,IgM抗体检出率3.0%,两组TORCH抗体阳性率相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

3 讨论

新生儿黄疸是新生儿时期的常见病,发病的主要原因是新生儿时期对胆红素代谢不成熟,血中胆红素水平增高,出现皮肤黏膜的黄染现象。过高的胆红素可以透过细胞膜进入细胞内,干扰细胞的代谢功能,引起细胞功能紊乱[3]。严重者可产生胆红素脑病,导致严重的后遗症,因此对于新生儿黄疸应该做到早诊断、早治疗。本组资料中显示新生儿黄疸组患儿TORCH特异性抗体检出率较对照组明显高,说明在新生儿黄疸发生原因中,TORCH病毒也是其中一个原因。TORCH病毒在大自然中广泛存在,感染途径多样,如果曾经感染过这种病毒,则抗体IgG出现阳性;如果近期刚感染,则抗体IgM检测阳性,因IgM抗体一个显著特点是无法通过胎盘屏障,故新生儿血清中TORCHIgM抗体检测,可明确表示患儿近期内的感染情况[4],故本文对新生儿仅检测抗IgM抗体。本研究表明,TORCH感染以CMV病毒为主,CMV病毒属疱疹病毒科B亚科,CMV病毒感染的新生儿临床表现多样,但大多数以黄疸为首发症状,黄疸程度及病程轻重不等[5]。目前关于CMV病毒是如何引起新生儿黄疸的研究正在进行中,新生儿黄疸发病机理中胆汁淤积是重要的一个环节,最近有研究推测机体感染CMV病毒后,会诱发体内肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生,从而通过一系列复杂的免疫反应,损伤新生儿肝脏细胞功能。正常情况下,胆汁在肝内产生后,通过胆管系统转运,其中各级胆管细胞担负着极其重要的作用,而CMV病毒感染后会损害胆管细胞功能,造成胆汁转运排泌受阻,从而引起胆汁淤积,最终导致新生儿黄疸的发生[6]。本组研究中,新生儿黄疸组抗CMV IgM抗体检测阳性率明显升高,在TORCH感染中所占比例最高,故表明CMV感染最易诱发新生儿病理性黄疸的发生。新生儿HSV感染大部分是在分娩过程中感染,很少经胎盘或血行感染,本组资料未检出HSV-IgM抗体,这也表明故抗HSV IgM抗体在新生儿早期检出率较低,同时抗HSV IgM抗体阳性率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),说明HSV感染与新生儿黄疸关系不大。弓形虫病在世界各地流行较广泛,由于它可通过胎盘由母体传给胎儿,故对胎儿及新生儿危害极大,在孕早期感染弓形虫后,会引起多种胎儿畸形,如脑钙化、小脑畸形、肝脾肿大等,甚至死胎,在孕晚期感染时,患儿会出现典型的弓形虫病临床表现,如肺部感染、肝功能损害、黄疸、血小板减少、脑瘫等[7]。本次研究中两组病例均未检出TOX-IgM,表明新生儿黄疸的发生与弓形虫感染关系不大。风疹病毒在人群中普遍易感,属于RNA病毒,但人体感染风疹病毒后一般症状比较轻,故在临床工作中未予重视。近年来先天性风疹综合征越来越受到重视,这类患儿往往伴有严重的出生缺陷,其中以先天性心脏病、白内障和神经性耳聋尤甚[8],研究表明本病发生原因多数是未感染过风疹病毒的孕妇在怀孕早期感染了风疹病毒,从而引起胎儿出生缺陷,本组资料检出1例风疹病毒抗体,故临床应予以重视。

综上所述,TORCH病毒感染对新生儿危害巨大,因此应引起儿科医师的高度重视,研究表明患儿感染TORCH后临床症状不典型[9],诊断仍依靠实验室检查。目前,诊断TORCH感染的方法主要为病原体分离培养、血清学检测和PCR等方法[10],PCR法灵敏度、特异度较高,但对试验平台要求较高,无法推广;病毒分离准确性最好,但不易操作,费时费力,临床推广较难;而目前条件下血清学检测相对简单易用,在临床工作中已广泛推广。本组研究表明,新生儿黄疸组患儿TORCH特异性抗体检出率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),表明在新生儿黄疸患儿诊治中TORCH抗体测定的必要性,有助于发现早期TORCH感染病例,从而尽早治疗,减少病残率的发生;同时也有助于早期鉴别病理性黄疸病因,减少核黄疸的发生率,因此表明TORCH抗体测定在新生儿黄疸诊治中具有举足轻重的意义。

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