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苹果轮纹病菌的多基因联合鉴定

2013-09-13贾广成周增强侯珲王丽朱建兰

生物技术通报 2013年7期
关键词:分析

贾广成 周增强 侯珲 王丽 朱建兰

苹果轮纹病是苹果生产中一种重要病害,主要危害苹果枝干和果实,因其防治难、危害重,是目前我国苹果生产的重要制约因素之一[1]。ITS基因,EF-1α基因和β-tubulin基因的 cDNA 序列已经从多种真菌中分离并对其生物学功能进行了初步研究[2]。GUADET等将分子系统学方法引入镰孢菌属种鉴定,主要通过ITS-rDNA、EF-1α、β-tubulin 等手段对镰孢菌进行系统学研究。微管是真核生物中普遍存在的结构,与微丝和中间纤维一起组成细胞质中三维网络结构的骨架系统。微管的组成为微管蛋白,主要的两种微管蛋白为A和B微管蛋白,A微管蛋白和B微管蛋白形成微管装配的基本单位-微管蛋白异二聚体。1963年,Ledbetter和Porter最先报道在植物细胞中存在微管结构。在植物病菌中,报道了若干 ITS基因,EF-1α基因和β-tubulin基因[3,4]的相关序列,但对其生物学功能还未进行深入研究[5]。微管蛋白和转录因子是真菌基因组主要的基因,在病菌的侵染过程中具有非常重要的作用。开展微管蛋白和转录因子的研究将为阐明苹果轮纹病菌在侵染过程中的致病机理提供理论依据[6]。为了鉴定苹果轮纹病菌并明确其主要致病基因的存在状况,从有代表性的苹果种植区采集并分离10个苹果轮纹病菌菌株,对引起苹果轮纹病的病原进行鉴定,并对病原的主要致病基因的存在状况进行初步研究,旨在达到联合鉴定苹果轮纹病菌的目的。

1 材料与方法

1.1 材料

从河南、辽宁和山东苹果种植区选择10株菌株。这些菌株采集于发病的枝干和果实,后经单孢或单菌丝分离得到,由中国农业科学院郑州果树研究所保存。……

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