张文丽 于寒松，2 朴春红 王舒婷 胡耀辉，2

葡萄糖淀粉酶（Glucoamylase EC3.2.1.3）又称γ淀粉酶（γ-amylase）或淀粉葡萄糖苷酶（Amyloglucosidase），简称糖化酶（缩写GA或G），是世界上应用范围最广、最重要的工业酶制剂之一［1］。随着世界经济的发展，能源短缺问题日益突出，可再生能源的开发利用问题受到高度重视。而糖化酶作为生产燃料乙醇必须的生物催化剂，在国际国内市场上的需求量大幅度上升，具有广阔的市场前景。然而，近30年来，糖化酶生产几乎成为一个被遗忘的角落，很少人继续从事这一课题的研究，致使菌种退化，产量下降，技术水平停滞不前。因此，开展糖化酶生产技术研究，选育优良菌株，革新生产工艺，已成为当务之急。这一研究不仅有利于传统酶制剂产业的技术进步，而且对应用酶制剂的相关产业的发展也具有巨大的推动作用［2］。

目前用于真菌分类鉴定的核酸序列分析最常选用的目的片段是rDNA。真菌基因组中编码核糖体的基因包括4种，28S rDNA、18S rDNA、5.8S rDNA和5S rDNA。真菌中18S rDNA是相对比较保守的序列，进化上变异性较小，且18S rDNA序列较长，相比之下包含了更多的遗传信息，使得对18S rDNA序列进行分析成为真菌分子学上鉴定菌种的主要方法［3］。本研究通过此方法，结合微生物自身特性对分离得到的一株产糖化酶菌株ZWL-1进行鉴定。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品 采自吉林某豆制品加工厂污水排放口处的土样。

1.1.2 主要培养基 （1）葡萄糖淀粉培养基：蛋白胨1.0％，酵母粉0.2％，牛肉粉0.3％，氯化钠0.2％，葡萄糖5％，玉米淀粉1.0％，琼脂粉1.7％，调pH值至4.6-5.0；（2）发酵培养基：葡萄糖8％，酵母粉0.5％，玉米糖浆1％，豆饼粉2％，磷酸二氢钾0.2％，硫酸镁0.02％，调pH值至4.6-5.0；……