黄 茜，杜昭平，马成杰，潘能庆，刘 蕾，马爱民,*

(1.华中农业大学食品科学技术学院，湖北 武汉 430070；2.乳业生物技术国家重点实验室，光明乳业股份有限公司技术中心，上海 200436)

乳酸菌作为基因工程菌表达外源蛋白时不会产生内毒素[1]，而且经改造后去除质粒的乳酸菌菌株基本不表达本源蛋白[2]，这些优点使其非常适合作为外源基因表达的宿主菌，所以乳酸菌食品级表达系统的构建和应用受到了研究者的重视。随着研究的深入，糖诱导表达系统、pH值诱导表达系统、温度敏感表达系统、乳链球菌素诱导表达系统、噬菌体φ3l爆发式诱导表达系统等乳酸菌表达系统被逐步建立[3-6]，并成功表达了人干扰素β、HPV-16 E7蛋白以及白细胞介素等多种外源物质[7-9]。

乳酸菌属于革兰氏阳性菌，具有厚且致密的细胞壁，载体DNA转化并进入受体细胞难度较大。相对于常规化学方法和电转化法，原生质体转化法设备条件要求较低、方法简单、结果可靠，具有明显的技术优势。原生质体的制备与再生是实现乳酸菌原生质体转化的技术关键[10]，近年来，已有关于保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌及瑞士乳杆菌等乳酸菌原生质体制备、再生及融合方面的研究报道[11-14]。

作为一种被公认为安全的(generally regarded as safe，GRAS)食品级微生物，干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)及其微生态制品日益受到国内外的重视，不但应用于益生菌发酵乳制品的生产，而且成为食品级基因克隆和高效外源表达系统研究与开发的热点[15-17]。L. casei LC2W(CGMCC No.0828)在模拟人体消化环境中具有较强的耐受性和优异的存活性能，降高血压等益生功能明显，具备较强的应用开发潜力[18]。……