杨依锦 王俊平 王 津 方淑兵 王 硕

（1.食品营养与安全教育部重点实验室，天津 300457；2.天津科技大学，天津 300457）

重金属铅酶联免疫检测方法的研究

杨依锦1，2王俊平1，2王 津1，2方淑兵1，2王 硕1，2

（1.食品营养与安全教育部重点实验室，天津 300457；2.天津科技大学，天津 300457）

制备铅离子多克隆抗体，并建立间接竞争ELISA检测方法。利用双功能螯合剂ITCBE将Pb2＋与载体蛋白KLH和BSA偶联在一起，制备免疫抗原与检测抗原；通过免疫新西兰大耳白免成功制备铅多克隆抗体，建立间接竞争ELISA检测方法，并与ICP－MS检测结果进行比较。标准曲线IC50为3.48ng／mL，IC15为0.32ng／mL，与ICP－MS法检测结果的总符合率超过97%。

铅；多克隆抗体；间接竞争ELISA

重金属是一种常见的污染源，其中铅的污染又尤为严重，对环境与人类造成了严重的危害。铅的毒性很强，是重金属污染中的“五毒”之一。它对人体的毒性作用包括神经毒性、肾脏毒性、造血系统毒性、心血管系统毒性、生殖系统毒性、关节毒性、内分泌系统毒性以及胃肠道和肝脏的毒性等，还会对儿童的生长发育产生影响［1－3］。

目前检测铅离子的主要方法有原子荧光光度法（AFS）、电感耦合等离子体质谱（ICP－MS）分析技术、电感耦合等离子原子发射光谱（ICP－AES）、高效液相色谱法（HPLC）等［4－8］，这些检测方法所需的仪器较昂贵，操作复杂，需要专业的工作人员。重金属免疫学检测方法是通过制备重金属的特异性抗体，利用抗原－抗体反应进行的快速、准确的检测方法，与传统检测技术相比有着快速，简单，价格低廉，适合现场监测等优点。本试验拟建立重金属铅间接竞争酶联免疫检测方法，同时将其用于实际样品添加回收的试验。……