毛文哲， 许 超， 李扬秋， 陈少华， 柳 菁， 刘 俊， 廖继东△

(暨南大学医学院1田家炳医学实验中心，2血液病研究所，3生物化学教研室，广东 广州510632)

间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是一群中胚层来源的具有自我更新和多向分化潜能的多能成体干细胞，在细胞治疗、组织修复、基因治疗等方面显示出巨大的应用潜力。人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC－MSCs)具有含量丰富、取材方便的特征，其采集过程对母胎均无不良影响，是理想的MSCs 来源［1］。

hUC－MSCs 较骨髓等其它组织来源MSCs 具有更强的分化增殖能力、更低的免疫原性，在体外连续培养达80 个细胞倍增时间可仍保持其多向分化潜能和增殖能力［2－3］。有学者采用基因芯片扫描不同培养条件下50 d 传代培养的人骨髓MSCs，显示其基因表达谱随培养时间的增加而波动幅度增大［4］。我们曾报道在常规体外培养环境下，随着传代次数的递增，hUC－MSCs 的增殖及粘附能力下降，细胞凋亡率增加，生物学活性呈逐渐下降趋势［5］。已知MSCs发挥其造血支持、免疫调节功能与细胞因子密切相关［6－7］。本研究进一步分析hUC－MSCs 在长期培养传代过程中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)、白细胞介素－6 (interleukin－6，IL－6)、IL－11 和半乳糖凝集素－3(galectin－3)mRNA 及蛋白表达趋势，为hUC－MSCs 的实验研究和临床应用提供实验资料和理论依据。

材 料 和 方 法

1 材料和试剂

无菌条件下采集足月剖宫产胎儿脐带6 份，均征得产妇及家属的同意，由暨南大学第一附属医院妇产科提供;DMEM/F12 培养基和胎牛血清购自Gibco;人脐带间充质干细胞成骨、成脂诱导分化培养基购自Cyagen;RNAsimple Total RNA Kit、TIANScript RT Kit、2 ×Taq Platinum PCR MasterMix 和RealMasterMix(SYBR GreenⅠ)购自北京天根生……