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携带中国株HIV-1 gp120 基因的重组腺病毒的构建及其感染巨噬细胞的形态学研究*

2012-12-23马文心郭嘉慧陈智鹏崔毅峙

中国病理生理杂志 2012年6期

王 通, 马文心, 郭嘉慧, 陈智鹏, 崔毅峙

(暨南大学生命与健康工程研究院,广东 广州510632)

我国HIV-1 的流行株主要为B、B'、C 及AE 亚型,其中中国株HIV-1 病毒主要指我国B 亚型流行株,针对其开展病毒学和病理生理学研究有现实意义[1]。

目前研究发现,HIV-1 感染者的癌症发生风险显著提高,从而形成了HIV-1 研究领域的一个备受关注的领域,即HIV-1 相关恶性肿瘤(HIV-1-associated malignancies,HAM)问题。HAM 研究主要以队列研究为主,目的是确证各种癌症与HIV-1 感染的相关性,而罕见针对HAM 发生机制的研究。

已知HIV-1 可在骨髓中感染造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs),以整合(原病毒)和未整合(胞浆HIV-1 DNA)形式建立潜伏感染,持续慢性复制和释放子代病毒[2-3]。原病毒在高效抗逆转录病毒治疗(highly active anti-retroviral therapy,HAART)下不会被根除,仍可在外周血单核细胞中持续,成为组织HIV-1 的来源[4]。例如,在HIV 脑传播机制中,有“木马假说”认为,携HIV DNA 的单核细胞可能跨血脑屏障,在大脑中建立HIV 感染[5]。而未整合HIV-1 DNA 也可能通过类似的木马机制被单核细胞传播至组织。这些携有HIV DNA 的单核细胞将会分化为含HIV DNA 的巨噬细胞,并进而启动组织炎症产生应答,从而提供多种刺激细胞增殖的细胞因子,包括IL-6、TNF-α 和IL-1[6]。

这些促增殖细胞因子可能是诱发HAM 的一个主要因素,HIV-1 gp120 蛋白就是这些因子在巨噬细胞内上调的病毒来源激动蛋白之一。因此,本研究首先构建可表达HIV-1 Gp120 蛋白的重组腺病毒,并将HIV-1 gp120 DNA 导入小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMM),并研究这种含HIV-1 gp120 DNA 的BMM(BMM-gp120)的形态学表型变化特征。

材 料 和 方 法

1 材料

1.1 主要材料 人胚肾转化细胞293Ad5+细胞系购自中国典型培养物保藏中心(CCTCC);6 ~8 周龄BALB/c 小鼠购自暨南大学实验动物中心;流式细胞仪FACS Aria 购自BD。……

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