黄崇杰，姜爱琴，刘长宝

大肠癌是常见的恶性肿瘤之一，近年来其发病率有明显上升趋势[1]。治疗以外科手术为主，但对中晚期的患者，化疗成为必须的辅助治疗。化疗对大肠癌的疗效不一，且毒副作用较大。近年来，有关辣椒素抗癌作用的研究在国内外日益受到重视，已有体外研究发现，辣椒素能明显抑制人胰腺癌、肝癌细胞生长[2-3]，辣椒素对肠癌细胞的作用效果及机制尚未阐明。本研究以HSP27 高表达的人结肠癌SW480 细胞为研究对象，观察辣椒素对结肠癌细胞凋亡的诱导作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 材料 人结肠癌细胞SW480 购自中科院上海分院；辣椒素购自美国Sigma 公司；RP-MI1640 培养基、0.05%的胰酶、购自美国Gibco公司；胎牛血清购自杭州四季青公司；二甲基亚砜(DMSO)购自美国Sigma 公司；CCK-8 细胞计数试剂盒购自日本同仁化学研究所；Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒购自南京凯基公司；逆转录PCR 试剂盒购自Fermanats 公司；β-actin 鼠抗人抗体、兔抗人HSP-27、兔抗人Active-caspase3 抗体、兔抗人Active-caspase9抗体购自英国Abcam公司；HRP标记的山羊抗小鼠、山羊抗兔IgG 购自美国Santa Cruz 公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒，ECL 化学发光显色试剂盒购自美国Pierce 公司、显影定影试剂盒购自碧云天生物技术研究所。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 SW480细胞培养于含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液中，饱和湿度、37 ℃、5%CO2培养箱内常规传代培养。待细胞生长至约70%～90%的融合状态用于实验。

1.2.2 药物配制 将12.2 mg 的辣椒素粉剂溶于100 μL 的DMSO 溶剂(二甲基亚砜)，配制成4×105μmol/L的母液，-20 ℃冰箱保存，用不含血清的培养基稀释母液，配制成终浓度为100 μmol/L、200 μmol/L、300 μmol/L、400 μmol/L 的辣椒素用于实验(各组含药培养基中DMSO终体积分数均小于0.1%)。……