孙胜杰，吴志勇，焦顺昌（解放军总医院肿瘤内科，北京 100853）

肺癌是目前最常见的恶性肿瘤之一，发病率日渐升高。在我国，肺癌占常见恶性肿瘤的首位，死亡率名列城市肿瘤死亡率的首位［1］。针对肺癌的化疗在临床上占有重要的地位，但其远期疗效较差。近年来，热疗作为一种新的治癌方法正引起医学界的重视，尤其是热疗与化疗联合应用，可以提高某些化疗药物的敏感性[2-6]。本研究旨在探讨温热对长春瑞滨增敏的规律及机制，为临床治疗提供实验参考。

1 材料和方法

1.1 药品和试剂

RPMI/1640培养液（GIBCO公司），胎牛血清（北京元亨圣马生物技术研究所），MTT（AMRESCO公司）；二甲基亚砜（DMSO，天津市科密欧化学试剂开发中心），碘化丙啶（PI，Sigma公司）和RNA酶（Sigma公司）；长春瑞滨（NVB，法国Pierre Farmos）。

1.2 主要仪器

WJ-301TVBA二氧化碳孵箱（美国Baxter），96孔板（美国COSTOR-3599），Multiskan MK3 353酶标仪（上海雷勃分析仪器有限公司），YKH-Ⅱ型液体快速混合器（江西医疗器械厂），XPTH-42电热恒温循环水槽（北京煤炭利用研究所，温度波动在±0.1 ℃）。

1.3 细胞培养与计数

人肺巨细胞癌细胞株（PLA - 801D）由解放军总医院病理科提供，细胞用RPMI/1640培养液(含10%胎牛血清，100 u·mL-1青霉素，100 u·mL-1链霉素)，置于37 ℃，5%CO2培养箱中常规传代培养。细胞制成悬液，加20 g·L-1台盼蓝染液混匀，细胞计数板计数活细胞数。全部实验用细胞均处于对数生长期。

1.4 MTT法测定肺癌细胞生长抑制率达30%时的NVB浓度（IC30）

取对数生长期的人肺巨细胞癌细胞按0.6×106· mL-1的密度接种于96孔板（200 μL/孔）, 培养24 h使其完全附壁后，加入以1.5倍倍比稀释的18个不同浓度的NVB溶液（初始浓度5 mg · mL-1），纵向顺序重复3孔。在37 ℃、5%CO2及饱和湿……