程木秋，霍海洋，张海山

（中国医科大学附属第一医院心内科，沈阳110001）

动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是严重危害人类健康的常见心血管疾病之一。血管内皮细胞的功能障碍和损伤被认为是AS发病的始动因素。但随着研究的深入，血管外膜作为AS发生、发展的重要因素日益受到重视。研究显示，AS引起的血管重塑与外膜有关［1］。伴随着AS的发生、发展，血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）的形态结构与功能也发生着变化，而血管外膜同样参与对 VSMC 的调节［2］。

研究发现，RhoA/ROCK（RhoA-binding kinase）信号系统在影响VSMC增殖和表型变化方面起重要作用。本研究采用硅胶管包裹大鼠颈动脉的方法建立血管外膜慢性炎性损伤介导的AS模型，观察了VSMC形态结构变化，并通过检测RhoA/ROCK信号系统的功能状态，探讨了在该模型条件下RhoA/ROCK信号系统对VSMC的调控作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物：12周龄雄性Wistar大鼠20只，体质量270～320 g。由中国医科大学实验动物部提供。

1.1.2 主要试剂及材料：RNAsimple Total RNA Kit、TIANScript RT Kit（TIANGEN 公司，中国）；BCA 蛋白浓度测定试剂盒（碧云天公司，江苏）；Mouse anti SM α-actin、Rabbit anti ROCK2 抗体（Abcam 公司，美国）；Rabbit anti Myocardin抗体（ABBIOTEC公司，美国）；硅胶医用管（济南晨生医用硅橡胶制品有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 动物模型制备及分组：大鼠适应性喂饲1周后，随机分为：（1）模型组（n=20）：常规麻醉后，消毒颈部正中皮肤，解剖分离出左、右两侧颈总动脉，包裹硅胶管 7 d构建模型；（2）对照组（n=20）：解剖分离出双侧颈总动脉后不包裹硅胶管，其余手术过程同模型组。自由进食饮水，7 d后处死，模型组截取包裹硅胶管的血管段，对照组留取相应血管段。

1.2.2 病理学检测：取左颈动脉包裹血管段1/2及对照组左颈动脉相应血管段，常规石蜡包埋，3～4 μm切片，HE染色。……