李晓明，郭敏，于嵩

（1.辽宁医学院组织学与胚胎学教研室，辽宁 锦州121001；2.辽宁中医药大学组胚教研室，沈阳110847）

肾脏集合管由两种细胞构成，主细胞和闰细胞，也分别叫做明细胞和暗细胞。其中闰细胞又分为A、B两种类型。水通道蛋白（aquaporins，AQP）是介导不同类型细胞膜跨膜转运水的通道蛋白［1］。AQP在肾脏的表达及发育性变化对于维持肾脏正常的尿浓缩功能至关重要，许多肾脏疾病如肾性尿崩症、多囊肾、急慢性肾功能衰竭等的发生均与AQP的异常有关［2，3］。本实验应用透射电镜、免疫组织化学、Western blot技术及体视学方法观察并检测小鼠肾集合管发育过程中主细胞和闰细胞的形态学变化及AQP-4的表达规律，探讨AQP-4与小鼠肾集合管细胞发育的相互作用关系。

1 材料与方法

1.1 动物培养和取材

昆明系小鼠雌雄（1∶1）同窝饲养。采用检查阴道栓出现的方法确定雌鼠受孕时间。见雌鼠阴道栓出现计为胚龄0 d（E0 d）。对孕鼠饲养2周后，每日早8时、晚5时观察生产情况，观察到仔鼠出生的最早时间计为生后0 d（P0 d），分别取胚龄14，16，18 d的胎鼠和生后1，3，7，14，21，42 d 的仔鼠各10 只。将孕鼠用乙醚麻醉后剖腹取出胎鼠，胚龄14，16，18 d的胎鼠剖腹取肾。生后各龄仔鼠颈椎脱臼处死，于腹后壁取肾。其中5只胎鼠和仔鼠的左肾入2.5%戊二醛固定液固定行透射电镜样品制备，右肾入10%甲醛固定液固定行石蜡切片制备。另5只胎鼠和仔鼠肾脏入液氮冷冻，-80℃保存。

1.2 透射电镜样品的制备

组织块用2.5%戊二醛固定液固定24 h后，取经肾门横断的薄片，将髓质切成1 mm3的小块，入……