维生素E对心肌氧化损伤的保护作用研究
2012-11-24韩蕴琪周余来
中国实验诊断学 2012年6期
陈 昕,赵 雷,韩蕴琪,孙 波,石 毅,周余来
(1.暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院 检验科,广东 深圳518020;2.吉林大学药学院 生物工程教研室,吉林 长春130021)
在人体的许多生理过程之中都有自由基的参与。心肌细胞是一种对自由基毒性敏感的组织,因为它含有丰富的酶和膜组织,二者都易被自由基所破坏。在多种心肌细胞损伤的情况下,均发现心肌细胞内有过量的自由基的产生[1,2]。因此,能够清除自由基,减轻过氧化损伤的药物即可对心肌细胞产生保护作用。维生素E能清除体内的自由基,是一种常用的抗氧化药物[3]。本实验旨在验证维生素E对阿霉素产生的心肌细胞过氧化损伤的保护作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物和试剂
实验使用新生 Wistar大鼠,清洁级,由吉林大学基础医学院实验动物中心提供(动物饲养合格证号:NO:0010281);新生小牛血清由Gibco公司提供;MEM培养基由Gibco公司提供;胰蛋白酶由HYCLONE公司提供;盐酸阿霉素为浙江海正药业股份有限公司产品;山莨菪碱为天津药业集团新郑股份有限公司产品;乳酸脱氢酶(LDHI)测定试剂盒、一氧化氮合成酶(NOS)测定试剂盒、丙二醛(MDA)测定试剂盒为南京建成生物有限公司产品。
1.2 实验方法
1.2.1 乳鼠心肌原代培养 取新生Wistar大鼠心肌细胞培养于MEM培养液中,加入10%灭活胎牛血清,细胞浓度1×105/ml,每孔200μl接种至96孔板中,37℃,5%CO2培养箱内培养。24h后,观察细胞,当心肌细胞贴壁后,换液。在培养48h后,可见心肌细胞连接成片,并产生有节律的自主跳动。
1.2.2 实验分组及造模给药方法 约48h之后,将培养细胞分组给药。……
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