许哲男，郑向宇，赵 维，辛 华，韩振国＊

（1.吉林大学中日联谊医院 胸外科，吉林 长春130033；2.吉林大学白求恩医学院 病理生理教研室）

氯通道是分布于细胞膜上对氯离子或其他阴离子有通透性的电压门控氯通道（voltage－gated Cl channel，ClC），哺乳动物共有9个亚型，广泛存在于机体的细胞膜和细胞器膜，参与细胞的多种活动和功能调节过程。研究发现多种肿瘤组织中都存在ClC－2蛋白的过度表达和处于磷酸化状态。本研究以非小细胞肺癌为研究对象，与正常肺组织作为对比，探讨氯离子同通道ClC－2在非小细胞肺癌及肺部疾病中表达情况，亦探明氯离子通道ClC－2作为治疗非小细胞肺癌的基因靶位提供有利的依据，为治疗该肿瘤提供新的理论根据及途径。

1 材料和方法

1.1 实验材料 实验分组 正常肺组织为对照组，肺鳞癌、肺腺癌、肺良性病灶为实验组。肺良性病灶以肺结核为主，部分为肺大泡和炎性假瘤。组织标本购于吉林大学组织标本库，均收集于吉林大学中日联谊医院胸外科2008.05－2009.08经手术切除后保存的新鲜冷冻组织，提供标本的患者术前未经放、化疗等系统抗癌治疗。

1.1.2 试剂 总RNA提取Trizol试剂盒购于Invitrogen公司，PCR试剂购自TaKara公司。反转录试剂盒，核酸分子量标准品，Taq酶，人ClC－2抗体（购自美国Santa Cruz公司）为一抗，辣根过氧化物酶（HRP）标记的人抗体为二抗，丙烯酰胺，甲叉双丙烯酰胺，M－MuLV RT、5XBuffer，M－MuLV RT Oligo d（T）Primers、购自（宝生物，日本），免疫组化超敏Ultrasensitive S－P试剂盒和DAB显示试剂盒（福州迈新公司），所有抗体均为即用型。

1.1.3 设备 低温高速离心机（久保田，日本），722分光光度计（上海仪器厂），PCR仪（TAKARA，日本），全自动数码凝胶成像分析系统（Tanon，中国），电泳仪（Bio－rad，美国），蛋白质电泳装置及转移系统（BioBrad，美国）。……