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某保健酒对老龄小鼠抗氧化作用的实验研究

2012-11-21向芳张国豪张信江

中国实用医药 2012年7期
关键词:保健酒寿星老龄

向芳 张国豪 张信江

“寿星宝”保健酒是由淫羊霍、丹参、黄精等中药和贵州茅台酒经现代工艺研制而成的一种药酒。具有益气活血、补肾防衰的功效。药酒是中药的一种剂型,包含有“酒的作用和药物功效”的双重作用。近年来中医中药在抗氧化方面做了大量研究,取得了较好的成果,其在抗衰老方面的作用也得到了全世界的公认。本实验从衰老生化指标的角度来探讨“寿星宝”保健酒对老龄小鼠的抗氧化作用,为进一步开发利用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 一般材料 SPF级12月龄的昆明种小鼠,,雌雄兼用,体重45~55 g,由第三军医大学实验动物中心提供。

1.2 受试药物 药酒系以淫羊霍、丹参、黄精、葛根、红花5种优质中药材为主要原料,以贵州茅台酒厂生产的酒度为53%酱香型的茅台酒作为基酒,经浸泡、过滤、提取制成。经毒理学安全性评价后,作为本实验的受试药物。

1.3 主要试剂与仪器 超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。SHHW21.420A电热恒温水箱、Multiskan Spectrum全波长酶标仪、FC104电子分析天平、Soniprep150超声波分解器、Thermo Heraeus Multifuge X1R冷冻离心机,实验仪器均由学院中心实验室提供。

1.4 实验方法

1.4.1 实验步骤 80只昆明种老龄小鼠随机分成4组:即老龄对照组,保健酒低剂量组,保健酒中剂量组及保健酒高剂量组,每组20只。保健酒样品按人体(60kg)推荐剂量为每人每天 60 ml,设计为 5、10、20 ml/(kg·d)三个剂量组,其中 10 ml/(kg·d)相当于人体推荐用量。老龄对照组给予等量生理盐水。各组均采用灌胃法,2次/d,连续3个月。给药期间各组每周重新称重1次,按体重的变化重新计算药酒的剂量。实验结束后眼眶取血并分离血清,按试剂盒测定方法测血清中SOD、GSH-Px活力和MDA含量。

1.4.2 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件处理,实验数据以表示,各组间比较用单因素方差分析进行检验。

2 结果

保健酒对老龄小鼠血清SOD活力、GSH-Px活力、MDA含量的影响见表1。表1显示:与老龄对照组相比,保健酒低、中、高剂量组SOD、GSH-Px活力均明显升高及MDA含量明显降低,差异具有显著统计学意义(P<0.01),其中中、高剂量组SOD、GSH-Px活力均明显高于低剂量组,MDA含量明显低于低剂量组,差异有显著统计学意义(P<0.01),而高剂量组SOD、GSH-Px活力亦高于中剂量组,MDA含量低于中剂量组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结果提示:“寿星宝”保健酒低、中、高剂量组均能明显提高小鼠血清SOD活力、GSHPx活力及降低MDA含量。其中高剂量组和中剂量组功效明显强于低剂量组,而高剂量组和中剂量组功效相当。

3 讨论

自由基学说是具有代表性的衰老学说之一。该理论认为:机体内时刻产生着自由基,但同时又存在有效的自由基清除系统,正常情况下机体内自由基的产生和清除是处在一种动态平衡状态的。随着年龄的增长,机体内抗氧化防御系统机能减退,造成自由基堆积而产生氧化应激损伤,最终导致机体的衰老[1]。SOD作为机体清除自由基的主要酶类,是抗衰老研究中公认的参考指标之一。由于各种原因引起SOD活性降低,会使自由基过度的攻击正常细胞,破坏各种生物膜,使细胞发生衰老、功能丧失。GSH-Px是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢分解的酶。它特异性催化还原型谷胱甘肽(GSH)对过氧化氢的还原反应,能清除有害的过氧化物代谢产物,起到保护细胞结构和功能完整的作用。MDA是体内多价不饱和脂肪酸组分受活性氧作用后过氧化反应的产物,由其含量可推断体内自由基生成的多少及自由基对机体的损伤程度。

表1 “寿星宝”保健酒对老龄小鼠血清SOD活力、GSH-Px活力、MDA含量的影响(,n=20)

表1 “寿星宝”保健酒对老龄小鼠血清SOD活力、GSH-Px活力、MDA含量的影响(,n=20)

注:与老龄对照组比较,★P<0.01;与保健酒低剂量组比较,▲P<0.01

组别 剂量[ml/(kg·d)]SOD活力(U/ml) GSH-Px活力(U/ml) MDA含量(nmol/ml)125.56±10.77 1126.42±75.47 69.60±10.39保健酒低剂量组 5 139.74±15.02★ 1261.80±121.95★ 57.86±11.69★保健酒中剂量组 10 160.71±14.30★▲ 1478.16±142.25★▲ 38.03±8.93★▲保健酒高剂量组 20 167.16±12.77★▲ 1546.09±129.22★▲ 32.63±6.74老龄对照组-★▲

“寿星宝”保健酒主要是选取淫羊霍、丹参、黄精、葛根、红花几种中药材,加入贵州茅台酒制成。现代药理学研究表明:淫羊霍中所含的黄酮及苷类具有清除自由基的能力,其抗氧化活性较强[2]。丹参中的丹参酮可减少自由基的产生,提高抗氧化酶活性[3]。黄精中的黄精多糖可显著提高抗氧化酶活性,增强机体的抗氧化能力[4]。葛根所含的葛根黄酮可提高抗氧化酶活性,增强其对自由基的清除能力,抑制脂质过氧化,降低体内MDA的生成,从而起到保护机体组织的作用[5]。红花中有效成分红花黄色素有抗氧化活性,具有较强的清除羟自由基和超氧阴离子自由基的能力,尤其对羟自由基的清除效果很好,清除率达98.31%[6]。贵州茅台酒具有独特的酿造工艺,除含有丰富的氨基酸和维生素外,还含有SOD及各种人体必需的微量元素,具有清除自由基、抗氧化、保护细胞的作用[7]。将上述各种具有协同作用的中药与酒溶于一体制成药酒,不仅配制方便、药性稳定、安全有效,而且酒精是一种良好的半极性有机溶剂,中药的各种有效成分都易溶于其中,药借酒力、酒助药势而充分发挥其效力,提高疗效。

本实验采用自然衰老动物模型,能够很好的反应衰老的病理生理状态。从本实验结果来看,“寿星宝”保健酒能显著提高老龄小鼠血清中的SOD、GSH-PX活力,同时亦明显降低MDA的含量,提示“寿星宝”保健酒具有提高抗氧化酶的活性,增强机体抗氧化和清除自由基的能力,从而起到预防和延缓衰老的作用。

[1]周倩倩,李运东.衰老机制研究进展.中国中医药现代远程教育,2011,9(6):148-149.

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[4]王玉勤,吴晓岚,张广新,等.黄精多糖对大鼠抗氧化作用的实验研究.中国现代医生,2011,49(5):6.

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