张 萍，马开军，张 恒，王慧君，沈忆文，陈 龙

（1.复旦大学上海医学院法医学系，上海 200032；2.上海市公安局物证鉴定中心 上海市现场物证重点实验室，上海 200043；3.复旦大学附属儿科医院 儿童发育与疾病转化医学研究中心，上海 201102）

实时RT-PCR常用内对照在死亡早期人心肌内的稳定性

张 萍1，马开军2，张 恒1，王慧君3，沈忆文1，陈 龙1

（1.复旦大学上海医学院法医学系，上海 200032；2.上海市公安局物证鉴定中心 上海市现场物证重点实验室，上海 200043；3.复旦大学附属儿科医院 儿童发育与疾病转化医学研究中心，上海 201102）

目的 探讨实时RT-PCR方法常用内对照表达水平在死亡早期人体心肌组织中的稳定性。 方法选取10例具有一致的外界环境（平均存放温度25℃）、不同死亡时间（4.3～22.3h）的个体，提取心肌组织的总RNA。选择6个常用内对照：β-actin、GAPDH、B2M、U6、18S rRNA、HSA-miR-1，通过实时RT-PCR检测其在心肌组织的表达水平。利用genormPLUS软件评估内对照在死亡早期表达水平的稳定性，挑选出最稳定的内对照并且分析其表达水平与相关因素（年龄、性别、死因）的关系。 结果 死亡早期心肌组织中U6表达水平最稳定，其表达量与年龄、性别及死因无关（P＞0.05）。 结论 U6可以作为实时RT-PCR方法研究死亡时间与心肌组织中核酸降解之间规律的理想内对照。

法医病理学；逆转录聚合酶链反应；心肌；内对照；死亡时间

死亡时间（postmortem interval，PMI）推断是法医学最重要的任务之一，准确的死亡时间推断，有利于迅速确定涉案罪犯以及排除嫌疑人[1-3]。传统的死亡时间推断方法主要根据尸体现象（如尸斑、尸冷、尸僵、角膜混浊等）[4]、胃内容物的消化程度、蝇蛆的生长规律[5-6]以及植物根系和苔藓类生物的生长变化[7]等，但这些方法都容易受到外界环境的干扰[1，8]。……