金玉芬，李艳蕾，华 艳，张晓刚，于 庭＊

（1.吉林大学第二医院，吉林 长春130041；2.北京英诺特生物技术有限公司，北京100070）

人巨细胞病毒（Human Cytomegalovirus，简称HCMV）属疱疹病毒β亚科，是一种DNA病毒，其感染在人群中广泛存在，我国人群中HCMV感染相当严重。HCMV是世界范围内引发先天性感染最常见的一种病毒，在活产儿中感染率为0.2%－2.0%，是风疹病毒感染的2倍［1］。妇女在妊娠初期受HCMV原发感染是引起胎儿宫内感染和发育缺损的重要原因，在孕期原发性感染HCMV的胎儿和新生儿中，80%可导致智力低下、畸形和死亡［2］。HCMV也是器官移植失败和艾滋病病人并发感染死亡的主要原因之一［3］。对非免疫缺陷者常导致长期隐性感染，甚至引起感染细胞的转化、畸变或癌变等［4］。因此快速准确的诊断HCMV病毒感染具有十分重要的意义。

HCMV的结构蛋白包括衣壳蛋白、被膜蛋白以及包膜蛋白。HCMV pp65是HCMV被膜蛋白中最主要的一种，主要是参与病毒基因调节以及改变宿主细胞的代谢，而且在不同的HCMV病毒株中，pp65具有高度的保守性［5］，含有IgM结合表位，对判断急性感染具有很重要的意义。Rolf［6］等的实验表明pp150的495－691aa片段是确诊HCMV既往感染的最适抗原（IgG结合表位），在检测HCMV原发及急性期感染中起着极其重要的作用。

1 实验材料

人巨细胞病毒培养物为中国预防医学科学院病毒研究所惠赠；细菌菌株及载体：pET28a质粒由本实验室保存，E.coli BL21购自北京新经科科技有限公司。酶及其他试剂：DNA polymerase，T4 DNA连接酶、Taq DNA聚合酶、限制性内切酶NdeⅠ和XhoⅠ均为TaKaRa公司产品；蛋白质分子质量标准、Ni－蛋白纯化柱购自北京新经科科技有限公司；……