结核分枝杆菌抗原模拟肽纳米金生物传感器诊断结核病
2012-11-05孙文霞袁仕善黄昊文谭云洪黄绍文张小萍
孙文霞,袁仕善*,黄昊文,谭云洪,黄绍文,张小萍
(1.湖南师范大学医学院,湖南 长沙410013;2.湖南科技大学化学化工学院,湖南 湘潭411201;3.湖南省结核病防治研究所,湖南 长沙410013)
结核病(Tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌感染引起的传染病,目前在全球范围内疫情非常严重,早期诊断和治疗是有效控制TB的重要途径。免疫学诊断是目前诊断结核病的常用方法,免疫学诊断的抗原主要有菌体蛋白、菌糖脂抗原、菌抗原模拟肽等;检测方法主要有酶免法。该方法简单快速,价格低廉,但需要酶标二抗和底物。表面等离子体共振(Surface plasmon resonance,SPR)技术是一种新型高灵敏度的生物传感技术,可直接、实时、原位、在线监测生物分子间的相互作用,无需任何标记,样品用量少,可连续监测结合和解离过程,并可以进行多组分复合物的相互作用研究[1,2]。纳米金生物传感器是一种基于纳米金局域表面等离子体共振(Localized surface plasmon resonance,LSPR)的非标记生物传感器,这类传感器以纳米金单层作为界面固定抗原/抗体,具有非特异性吸附小、传感器能反复再生等优点,非常适于抗原-抗体相互作用的研究[3,4]。本研究旨在纳米金生物传感技术的基础上,以结核分枝杆菌模拟肽为抗原,建立纳米金生物传感器,为结核病的诊断提供新的理论依据和技术支持。
1 材料和方法
1.1 材料
硼氢化钠(NaBH4)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、抗 坏 血 酸 硝 酸 银 (AgNO3)、氯 金 酸(AuCl3)均购于国药集团化学试剂有限公司,十一巯基十一烷酸(MUA)购于美国Sigma公司,N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)购于上海晶纯试剂有限公司,均为分析纯;……
