大鼠菌血症模型的建立及其感染时对肝脏功能的影响
2012-11-05李京京赵永峰冯瑞祥
李京京,王 丹,吴 刚,赵永峰*,冯瑞祥
(武警江苏总队南京医院1.影像科;2.检验科,江苏 南京210028)
菌血症是常见的外科感染性并发症,它可引起严重的SIRS和MODS,在临床上具有很高的致死率[1,2]。导致菌血症的原因有很多,例如创伤、术后感染、静脉置管、肠道细菌移位等[3]。如何早期诊断感染的发生,是我们目前临床面临的重要问题。尽管目前临床上有诸多感染检测指标如体温、白细胞计数、C-反应蛋白、细胞因子(TNF-α、IL-6)等,但由于这些检测指标缺乏特异性,在很大程度上影响了对感染早期诊断的准确性。因此,建立一种重复性好、简单可靠的菌血症动物模型,对我们研究细菌感染的发病机制以及筛选感染标志物具有重要的意义。
1 材料和方法
1.1 菌株和动物
肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumonia)和大肠杆菌(Escherichia coli)由本室分离,源自大鼠肠道。SD大鼠,由南京军区南京总医院实验动物中心提供,雌性,180-200g。
1.2 主要试剂
麦康凯培养基购自OXOID公司,PCT试剂盒购自R&D公司。
1.3 细菌培养
将-80℃保存的肺炎克雷伯菌和大肠杆菌菌种接种于新鲜配制的LB液体培养基,37℃培养18h。然后离心,用灭菌的PBS洗涤菌体2次,后用无菌的生理盐水重悬菌体,并调整菌液浓度为(2-4)×1010CFU/ml。
1.4 菌血症感染模型的制备
实验分组:SD大鼠64只,雌性,体重180-200 g,将其随机分为3组:生理盐水对照组(16只);肺炎克雷伯菌感染组(24只),大肠杆菌感染组(24只)。将大鼠适应1周后,开始造模。在感染的第0天,对照组尾静脉注射无菌生理盐水(0.3ml/只),对于感染组,分别尾静脉注射肺炎克雷伯菌和大肠杆菌菌液(0.3ml/只)。注……
