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γ 射线照射对椎间盘生物学活性的影响

2012-11-04阮狄克王超锋

脊柱外科杂志 2012年6期
关键词:剂量实验

丁 宇,阮狄克,何 勍,王超锋

鉴于脊柱融合术后易导致邻近节段的退变,异体椎间盘移植(total disc allografting,TDA)等椎间关节成形术近年来得以快速发展,系列动物实验及一期临床研究均证实了TDA 作为自然生物椎间盘移植的有效性[1-2]。然而,异体组织材料在临床的应用过程中还应考虑到其安全性,即尽量减少诸如肝炎、HIV 等病毒,细菌或真菌等所致疾病传播的可能性。另外,随着椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)生物学治疗的发展,诸如组织工程构建椎间盘、基因治疗、间充质干细胞移植等均具有令人鼓舞的应用前景[3-4],人们期望找到一种可靠的生物支架用于椎间盘疾病的相关研究。本研究通过比格犬动物实验,旨在评价经γ 射线照射致去细胞化异体椎间盘的生物学特性,进而探讨其作为生物椎间盘支架的可行性。

1 材料与方法

1.1 标本来源

共选择6 只比格犬,动物实验方案事先得到医院动物实验道德委员会批准。所有犬实验前均行X线检查,以排除脊柱疾患的可能。应用超剂量戊巴比妥钠(1 mL/kg)静脉注射处死实验动物,并获取尽可能长的脊柱节段。

1.2 实验分组

胸腰椎脊柱节段被分解并随机分为4组:1 个对照组(椎间盘未被照射处理)及3 个处理组(不同剂量射线照射处理)。每组含有12 个实验样本,其中6 个样本用于细胞活性检测(主要为胸椎),另外6 个样本用于生物力学测试(主要为腰椎)。射线照射剂量分为18 kGy,25 kGy 及50 kGy 3 个等级,照射完毕后各实验组标本立即送往细胞检测,并尽早行生物力学测试。

1.3 实验方法

1.3.1 椎间盘准备及冷冻

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