固定化细胞转化脱氧胸苷合成2'-脱氧腺苷
2012-11-04刘国生邢善涛王建琨
中国生化药物杂志 2012年5期
刘国生,陈 琳,邢善涛,王建琨,焦 璐,魏 聪
(1.河南师范大学 生命科学学院,河南 新乡 453007;2.新乡拓新生化科技有限公司,河南 新乡453000)
固定化细胞转化脱氧胸苷合成2'-脱氧腺苷
刘国生1,陈 琳1,邢善涛2,王建琨1,焦 璐1,魏 聪1
(1.河南师范大学 生命科学学院,河南 新乡 453007;2.新乡拓新生化科技有限公司,河南 新乡453000)
目的 选择最优的载体包埋固定化AEM0957细胞酶促催化脱氧胸苷和腺嘌呤合成脱氧腺苷。方法分别用琼脂、聚丙烯酰胺、明胶、卡拉胶、海藻酸钠、聚乙烯醇等6种材料包埋固定细菌AEM0957细胞,以此为催化剂转化脱氧胸苷合成脱氧腺苷。结果 通过优化反应条件,聚丙烯酰胺固定化细胞催化脱氧胸苷的转化率可达57%,高于游离细胞反应能力,并能多次重复使用,10次重复反应的转化率仍能够保持在32%左右。结论 聚丙烯酰胺在稳定性、转化性能等方面优于其它材料,该研究为脱氧腺苷的工业化生产奠定了重要基础。
脱氧腺苷;脱氧胸苷;生物合成;固定化细胞;聚丙烯酰胺
抗病毒药物如拉米夫定、阿德福韦、替比夫定和恩替卡韦等都属于核苷类或核苷酸类化合物,其中部分采用化学合成法生产,如已应用于临床的阿糖腺苷、三氮唑核苷等[1]。2-脱氧腺苷(Deoxyadenosine,dA)是一种天然的脱氧核苷,是脱氧核糖核酸DNA的结构片段,被广泛地应用于合成寡聚核苷酸和基因工程的研究中,同时是合成多种抗病毒、抗肿瘤药物的重要中间体[2-4]。现在可以采用游离细胞(酶)法转化脱氧胸苷(Deoxythymidine,dT)合成dA[5-7],但由于游离细胞(酶)进行生物合成中,所制备的细胞或酶一次性使用,造成生产成本很高。……
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