高效液相色谱法测定酵母粉腺嘌呤含量
2012-11-04刘国生王玉娟纪龙翔王秀强
中国生化药物杂志 2012年5期
刘国生,黄 倩,王玉娟,纪龙翔,王秀强
(1.河南师范大学 生命科学学院,河南 新乡 453007;2.新乡拓新生化科技有限公司,河南 新乡453000)
高效液相色谱法测定酵母粉腺嘌呤含量
刘国生1,黄 倩1,王玉娟1,纪龙翔1,王秀强2
(1.河南师范大学 生命科学学院,河南 新乡 453007;2.新乡拓新生化科技有限公司,河南 新乡453000)
目的 建立高效液相色谱法测定酵母粉腺嘌呤的含量,为酵母粉质量评价奠定方法学基础。方法 将酵母粉经过破壁处理后用高氯酸消解制备提取液,通过条件实验确定高效液相色谱法分离条件并测定腺嘌呤含量。结果 采用Diamonsil C18柱,以0.02 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.0)为流动相,流速为0.8 mL/min,可以将腺嘌呤与其它成分有效分离。采用121℃高温高压-SDS法进行酵母粉前处理能有效破壁和促进核酸物质的释放,腺嘌呤测定值更接近其实际含量。结论 采用高温高压-SDS法制备酵母粉提取液、高效液相色谱测定腺嘌呤含量的方法简单易行、重现性好,测定结果可作为酵母粉质量评价的重要定量指标,对发酵生产有重要指导意义。
腺嘌呤;酵母粉;肌苷发酵;高效液相色谱法
肌苷发酵属于代谢控制发酵,生产所用的菌株是腺嘌呤缺陷型菌株,需在发酵原料中提供适宜浓度的腺嘌呤[1-3]。目前国内均利用天然培养基进行的肌苷发酵生产,腺嘌呤主要来自于酵母粉。肌苷产量很容易受到酵母粉原料质量的制约。不同厂家生产的酵母粉原料,其腺嘌呤含量有很大差别,甚至同一厂家不同批次的产品也会因生产季节、原料等变化而出现波动,从而影响肌苷发酵的产量[1],造成生产不稳定。……
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