槟榔籽中抗氧化活性物质的分离与结构分析
2012-11-02王兆丹张海德罗仕数
韩 林,王兆丹,张海德,罗仕数
(1.重庆三峡学院生物系,重庆404100;2.海南大学食品学院,海南海口570228)
槟榔籽中抗氧化活性物质的分离与结构分析
韩 林1,2,王兆丹1,张海德2,*,罗仕数2
(1.重庆三峡学院生物系,重庆404100;2.海南大学食品学院,海南海口570228)
为了研究槟榔籽中的抗氧化活性物质,通过柱色谱法分离纯化槟榔籽乙醇提取物,结合抗氧化活性筛选,分离得到槟榔籽中主要的抗氧化活性物质Fr-4。利用高效液相色谱分析其纯度,经波谱分析确定该物质为表儿茶素。
槟榔籽,分离,抗氧化活性
槟榔 采摘自海南大学儋州校区植物园,海南品种,破壳取槟榔籽,干燥后备用,经测定,槟榔籽粉末含水量为5.32%;ABTS 购自Amersco公司;甲醇、氯仿、乙酸乙酯、石油醚、正丁醇、无水乙醇等 均为国产分析纯。
UV-2450紫外可见分光光度计 日本岛津公司;HH-8型数显恒温水浴锅 金坛市医疗仪器厂;FW80微型高速试样粉碎机 河北省黄骅市新兴电器厂;CP225D型分析天平 德国Sartorius公司;RE52CS-2型旋转蒸发器 上海亚荣生化仪器厂;LABCONCO型真空冷冻干燥器 美国LABCONCO公司;Waters 2695高效液相色谱仪 美国Waters公司;400MHz核磁共振波谱仪 瑞士布鲁克公司。
1.2 实验方法
1.2.1 ABTS实验方法[3-4]取5.0mL 7mmol/L的ABTS溶液,加入88.0μL 140mmol/L的过硫酸钾,在室温下置于暗处反应12~16h,形成ABTS自由基储备液。在734nm处,用体积分数70%的乙醇将ABTS自由基储备液稀释至吸光度为0.70±0.02,备用。准确量取0.1mL不同浓度(50、100、150、200μg/mL)的样品溶液,加入3.9mL ABTS+·溶液,混匀,在室温下反应6min,于734nm处测定吸光度(AE)。同时吸取3.9mL ABTS+·溶液,加入0.1mL体积分数70%的乙醇溶液于734nm处测定吸光度(AB)。ABTS自由基清除率按下式计算:……p>
