孟晓华，段 杉

（华南农业大学食品学院，广东广州 510642）

生鲜罗非鱼片在冷藏过程中细菌群落演替的PCR-DGGE分析

孟晓华，段 杉*

（华南农业大学食品学院，广东广州 510642）

分析了生鲜罗非鱼片在腐败过程中细菌群落的演替规律。以4℃有氧冷藏条件下的生鲜罗非鱼片为研究对象，定期提取鱼片上的细菌总DNA，采用16S rDNA PCR-DGGE技术连续分析细菌群落演替，对DGGE电泳胶片上的主要DNA条带进行序列分析并构建系统发生树。结果表明：9个主要的DNA条带所代表的细菌来源于以下几个属：希瓦氏菌属（Shewanella）、无色杆菌属（Achromobacter）、不动杆菌属（Acinetobacter）、嗜冷杆菌属（Psychrobacter）、假单胞菌属 （Pseudomonas）、 短 杆 菌 属 （Brevibacterium）、 迪 茨 氏 菌 属 （Dietzia）、 紫 色 杆 菌 属 （Janthinobacterium）、 黄 杆 菌 属（Flavobacterium）。在冷藏初期即第0～6d鱼片上的细菌包括8个属，即无色杆菌属、希瓦氏菌属、嗜冷杆菌属、假单胞菌属、不动杆菌属、短杆菌属、迪茨氏菌属、紫色杆菌属；冷藏9d后鱼片发生腐败，此时无色杆菌属、希瓦氏菌属、嗜冷杆菌属和假单胞菌属的细菌成为优势种；冷藏12d时出现黄杆菌属细菌。

罗非鱼，PCR-DGGE，腐败，细菌群落演替，16S rDNA

罗非鱼片容易因微生物活动造成腐败变质，为针对性地控制罗非鱼片的腐败微生物，首先需要分析其上附着的微生物群落的演替规律。关于鱼肉腐败微生物的分析，国内外已有不少报道，但多数研究采用的是传统的微生物培养法，这种方法有很大局限性，因某些微生物目前还无法培养，据推测，自然界中85%～99%的微生物至今不可培养[1-3]。近年来，随着分子生物学相关技术的发展，基于检测微生物核酸的非培养检测技术发展迅速。……