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草菇有性世代间rDNA序列变异分析及RAPD分析

2012-10-24徐学锋姬宏超李巧玲莫美华

食品工业科技 2012年10期
关键词:分析

徐学锋,姬宏超,李巧玲,莫美华

(华南农业大学食品学院,广东广州 510642)

草菇有性世代间rDNA序列变异分析及RAPD分析

徐学锋,姬宏超,李巧玲,莫美华

(华南农业大学食品学院,广东广州 510642)

草菇的遗传与有性生殖过程存在很多的特殊性和不确定性,本研究以草菇V23菌株的成熟子实体弹射孢子,单孢分离后得13个单株,分别摇瓶培养、收集菌丝,提取总DNA,用通用引物ITS4、ITS5进行PCR扩增后连接、转化并测序,将单孢间和单孢与亲本间的ITS序列进行比对,分析草菇ITS序列多样性及变异性;同时以相应单孢菌株DNA为模板,用20条随机引物进行RAPD扩增。结果表明:草菇单孢间和单孢与亲本间的ITS序列相似度均在99%以上,相较于亲本的ITS序列,单孢序列中发现了有5个位点出现碱基转换,但没有两个以上的单孢发生同一转换;20条随机引物分别与14个样本进行RAPD扩增,其中3个引物出现多态性条带,带型结果发现单孢菌株间的带型差异呈现一定规律。草菇ITS序列变异较少,不适于单孢间的变异分析,而RAPD方法对摸索草菇有性世代间的遗传分离规律有重要价值。

草菇,ITS,RAPD,同宗结合

草菇(Volariella volvacea(Bull.ex.Fr.)Sing.),是一种喜温、喜湿的草腐型食用真菌,又名苞脚菇、广东菇等,是我国南方食用菌栽培的主要品种之一。草菇的性模式十分复杂,其子实体产生的有性单孢子可以不与其它孢子融合而产生新的子实体。Chang等人[1-3]通过研究草菇抗性突变体、营养缺陷型等的分离规律,初步认为草菇是初级同宗结合菌。然而,早在1971年,S T Chang和C K Yau[4-5]发现在草菇的单孢子分离物中存在大量变异,这对已有的草菇遗传模式的解释提出了质疑,且到目前为止仍未得到充分解释。……

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