TGF-β1基因修饰的脾细胞对大鼠肝脏移植免疫耐受的实验研究
2012-10-17闫振,李卫,吴波
闫 振,李 卫,吴 波
哈尔滨医科大学附属第四医院1.普外科;2.显微外科,黑龙江 哈尔滨 150001
肝脏移植(liver transplantation,LT)目前已成为治疗终末期肝病最有效的方法,然而同种异体排斥反应仍然是器官移植的主要障碍,虽然全身应用免疫抑制剂可以延长受体生存时间,但是可导致受体出现免疫功能低下,易发感染和肿瘤倾向[1]。郑树森等报道证实随着移植技术和免疫抑制剂的应用,LT患者的一年生存率有很大提高,为90%[2],如何有效减少排斥反应或抑制排斥反应,是目前器官移植的研究热点。转化生长因子β1是有效地免疫调控和免疫抑制分子,它在机体免疫系统中的广泛免疫抑制作用,对细胞免疫、体液免疫以及主要参与免疫反应的一些细胞因子都有调控作用[3]。TGF-β1在心脏移植、肾脏移植、血管移植中有广泛报道,但在肝脏移植中报道较少,本实验利用输注TGF-β1修饰的供者脾细胞研究TGF-β1质粒与肝脏移植的关系。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物:供体为SD大鼠40只,受体Wistar大鼠40只,均为健康雄性,体质量为250~300 g,SPF级,均由哈尔滨医科大学实验动物中心提供。实验过程对动物处置符合动物伦理学标准。
1.1.2 主要试剂:脂质体2000试剂盒及Trizol试剂:美国Invitrogen公司;质粒pAdtrack-CMV-TGF-β1质粒和pAdEasy-1-Bj51833细胞株:华中科技大学同济医学院附属协和医院传染病实验室曾令兰教授惠赠;DP107-02高纯度质粒小量试剂盒:北京天根公司产品;RPMI 1640培养基及新生牛胎血清:奥地利PAA公司;台盼蓝染色试剂:上海碧云天产品;TUNEL检测试剂盒:上海罗氏公司。
1.2 方法……p>
