曾 鑫，王永星，姚 武，付晓丽，郝长付#

1)郑州大学药学院 郑州 450001

2)郑州大学公共卫生学院劳动卫生学与职业病学教研室 郑州 450001

转分化是指一种分化完全的细胞由于某些因素作用，丢失其原有表型特点而转变为其他类型细胞的一种特定的生理或病理过程[1]。在矽肺发生过程中，SiO2可刺激肺泡巨噬细胞分泌各类活性介质，尤其是转化生长因子TGF-β1，诱导肺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞，其α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及胶原蛋白(COL)表达上调，凋亡受到抑制，促进细胞增殖和胶原合成，最终引起肺纤维化[2-3]。以往在肺成纤维细胞转分化的研究中多采用细胞间接共培养法即将巨噬细胞、成纤维细胞分别培养，再用巨噬细胞上清刺激成纤维细胞。细胞直接共培养方法则是借助Trans-well小体将两种细胞进行共培养。该研究中作者分离了SD大鼠肺巨噬细胞和成纤维细胞，采用ThinCertTM建立直接共培养模型，加入不同质量浓度的SiO2，观察肺成纤维细胞转分化的过程，确定直接共培养模型的价值，为进一步研究肺成纤维细胞转分化的表观遗传学调控机制奠定基础。

1 材料与方法

1.1 实验材料 清洁级成年雄性SD大鼠购自河南省实验动物中心，许可证号为SCXK(豫)2010-0002。游离SiO2粉尘标准品(粒径为1～5 μm，美国Sigma公司)，180℃恒温下烘烤4 h，用DMEM培养液(索莱宝公司)制成粉尘悬液(1 g/L)，4℃贮存备用。

1.2 大鼠肺成纤维细胞的提取和纯化 参照严玉兰等[4]方法。

1.3 大鼠肺巨噬细胞的提取、纯化和活性鉴定 参照丁焕然等[5]的方法提取大鼠肺巨噬细胞，然后加入不同质量浓度的SiO2粉尘悬液处理，采用MTT法检测巨噬细胞活性，确定后续实验中SiO2的质量浓度。……