张 嵩，郝 斌#，李惠翔，张海鹏

1)郑州大学第二附属医院泌尿外科 郑州 450014

2)郑州大学第一附属医院病理科 郑州 450052

前列腺癌是老年男性常见的泌尿生殖系统恶性肿瘤，在欧美地区的发病率很高。随着我国人民饮食结构、生活条件及人口老龄化的改变，前列腺癌的发病率逐渐增加[1]。已知信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的异常活化在肿瘤的发生发展中起着重要的促进作用，而JAK2激酶的异常激活是 STAT3 信号通路活化的起源[2]。研究[3]显示，α-氰基-(3，4-羟基)N-苄苯乙烯胺(AG490)为 JAK2激酶抑制剂，能够有效阻断STAT3信号通路的活化，进而抑制肿瘤细胞的生长，促进其凋亡。作者观察了AG490对前列腺癌DU145细胞增殖及STAT3信号通路相关蛋白表达的影响，以进一步探究其抗癌机制。

1 材料与方法

1.1 材料 DU145细胞购自武汉博士德生物工程有限公司。AG490购自德国Biosciences Inc公司，噻唑蓝(MTT)及二甲基亚砜(DMSO)购自美国Sigma公司，Western blot所需的蛋白提取试剂盒和抗磷酸化 JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化 STAT3(p-STAT3)、Cyclin D1及BCL-xL抗体均购自武汉博士德生物工程有限公司。

1.2 细胞增殖抑制率观察 DU145细胞在含体积分数10%新生牛血清+100 U/mL双抗(青霉素+链霉素)的DMEM高糖培养基，37℃、体积分数5%CO2下培养24 h后，取对数生长期细胞接种于96孔板，每孔1×104个。继续培养24 h后分组，每组6个复孔，对照组单纯用DMEM高糖培养基培养，AG490各浓度组分别加入终浓度为10、25、50及80 μmol/L 的 AG490，继续培养 24、48、72 h 后每孔加入15 μL 5 g/L的MTT，37℃继续孵育4 h后终止培养，弃上清，每孔加入150 μL DMSO。上机检测490 nm波长处的吸光度值(A)，细胞增殖抑制率=(1－实验组A值/对照组A值)×100%。

1.3 STAT3信号通路相关蛋白的检测 采用Western blot法。……