刘伟 高菊芳

(上海师范大学生命与环境科学学院，上海 2000234)

生物化工

Ⅰ型聚酮类天然产物中利用点突变产生类似物的研究

刘伟 高菊芳

(上海师范大学生命与环境科学学院，上海 2000234)

点突变是指通过聚合酶链式反应（PCR）等方法向目的DNA片段中引入所需变化（通常是表征有利方向的变化），包括碱基的添加、删除、改变等。通过构建发生突变的质粒利用遗传转移的方法同源重组到野生型基因组中，使得氨基酸改变从而引起蛋白功能发生变化，获得鉴定正确的突变株后发酵筛选结构类似物。聚酮类天然产物在生物合成过程中，其聚酮链会发生若干步氧化还原反应，通过点突变的方法失活该蛋白，从而跳过该步氧化还原反应的作用，产生PKS骨架上的改变，从而得到结构类似物。

聚酮类化合物；点突变；结构类似物

聚酮类天然产物是一大类以乙酰或丙二酰单酰辅酶A为延伸或者起始模块，在聚酮合成酶（polyketide synthase，PKS）催化下经过多轮克莱森缩合（Claisen缩合）和高度修饰后形成的天然产物，许多细菌尤其是放线菌、真菌甚至植物都具有形成此类天然产物的能力，一般来讲，该合成阶段都发生在次级代谢阶段，有些甚至不是其生长繁殖所必需[1-2]。

这一类天然产物通常具有诸如红霉素等抑制细菌、两性霉素等抑制真菌以及阿霉素等控制癌症的活性，广泛运用于医药、农业、畜牧业等。其良好高效的生物学活性、巨大的新药开发潜质、还有独特的酶学机制以及蛋白间的相互识别作用无不吸引和推动大家的重视与研究。……