张小恒，余占海，张国英

（1.甘谷县人民医院，甘肃 甘谷 741200；2.兰州大学口腔医学院，甘肃 兰州 730000）

实验表明，TGF-β1 在体外具有促进牙周膜细胞增殖和分化的作用，而牙周膜细胞又是牙周组织再生的基础[1]，TGF-β1能抑制大鼠牙周炎模型牙周组织中IL-6 的表达，对骨钙素的表达起促进作用，同时还能促进牙周组织再生[2]。本实验在成功建立大鼠实验性牙周炎模型的基础上，通过注射TGF-β1，观察大鼠牙周组织病理变化状况，并采用免疫组织化学SABC 法检测大鼠牙周组织中IL-1β、TNF-α水平变化，从而探讨TGF-β1治疗牙周炎的分子机制。

1 材料和方法

1.1 主要实验材料

TGF-β1(PeproTech 公司)，二甲基亚砜（亚太精细化工公司），盐酸氯胺酮注射液（古田药业有限公司），浓度为0.01 mol/L 的PBS、0.01 mol/L 的枸橼酸盐缓冲液和DAB 显色试剂盒（中杉金桥有限公司），即用SABC 免疫组织化学染色试剂盒（武汉博士德生物有限公司），多聚赖氨酸（中杉金桥有限公司），兔抗IL-1β单克隆抗体、兔抗TNF-α 单克隆抗体（武汉博士德生物有限公司），AX80 自动研究级系统显微镜（Olympus公司）。

1.2 Wistar 大鼠实验性牙周炎模型的建立

选用160～200 g Wistar 大鼠50只，雌雄各半，以10 ml/kg腹腔注射盐酸氯胺酮全麻成功后，固定四肢及头部，牵开口角，用口腔正畸结扎钢丝（直径0.2 mm）结扎右上颌第2 磨牙一圈，将结扎丝放入游离龈内，深度以不损伤牙龈的结合上皮，又要尽可能避免结扎后发生滑脱现象。同时，肌注醋酸泼尼松龙5 mg/kg，每2日一次，共7次；然后每3日一次，共2次，定期复查。采取颈椎脱臼法处死随机抽取的5只造模大鼠和5只未造模大鼠（其中未……