李凤美，周永斌，訾惠君，刘连强

（天津市林业果树研究所，天津 300384）

食用菌菌种的包埋是指采用物理方法，将食用菌菌丝体包裹在凝胶的网格结构中或半透性聚合薄膜内，使其保持活性并可反复使用的一种技术。包埋法操作简单，条件温和，包埋后的微环境相对封闭，是目前固定化技术中最有效和实用的一类方法。被包埋的菌种常常用于液体发酵上，生产初级或次级代谢产物，有关研究显示食用菌菌丝体包埋后，相比游离细胞不仅延长了菌种的应用时间，且发酵得到的目标产物均有小幅提高[1-3]。

包埋载体的选择是包埋技术中十分关键的一步，所选择的载体应无毒，不影响细胞代谢，有一定的保水性，成本低，有较高的细胞负载量和活性[4]。本实验选取不同的载体材料对食用菌菌种进行固定化包埋，通过比较载体的机械强度、操作难易、有无毒害、菌株复水活化情况等选出适合的载体，并对包埋剂的浓度、成分配比等进行试验研究，从而确定最适的包埋条件。

1 实验材料

1.1 菌种

所用菌种为本实验室自有的平菇、灵芝、杏鲍菇菌种。

1.2 培养基

PDA综合培养基：马铃薯去皮200 g（加水煮沸20 min，过滤取汁）、葡萄糖20 g、磷酸二氢钾3 g、硫酸镁1.5 g，水1 000 mL，pH值5.8~6.2。分装，0.1 MPa灭菌20 min。

1.3 实验试剂

海藻酸钠（SA）、聚乙烯醇（PVA）、卡拉胶、明胶、丙烯酰胺单体、N，N'－亚甲基双丙烯酰胺（BIS）、四甲基乙二胺（TEMED）、过硫酸钾（K2S2O8）、二醋酸纤维素、2%氯化钙溶液（121℃灭菌30 min）、4%硼酸溶液（121℃灭菌30 min）、丙酮，以上化学试剂均为分析纯。

2 实验方法

2.1 菌丝体细胞悬浮液的制备方法

制备PDA液体培养基，分装后121℃灭菌30 min，冷却。……