脑出血患者抵抗素基因+299G>A 位点多态性分析
2012-09-11董晓巧俞文华张祖勇翁建丰车志豪
董晓巧 杜 权 俞文华 张祖勇 陈 隽 翁建丰 朱 强 车志豪
脑出血发病率高,预后差[1,2]。炎症反应参与脑出血后继发性脑损伤[3,4]。抵抗素是一种首先发现由白色脂肪细胞分泌的肽类激素,可表达于脑外伤及脑缺血动物脑皮质,参与炎症反应[5~8]。我们最近研究发现,脑出血患者血浆抵抗素水平升高,且与预后显著相关[9]。抵抗素基因内含子2区+299G>A位点A等位基因的存在可以增加血液及组织中抵抗素的表达,从而影响其生物学效应,但其与脑出血相关研究少见报道[10,11]。本研究运用限制性内切酶方法,对抵抗素基因+299G>A位点进行多态性分析,旨在揭示抵抗素基因+299G>A位点多态性与脑出血炎症反应的相关性,为脑出血继发性脑损伤研究提供遗传学基础。
资料与方法
1.一般资料:脑出血病例为2007年1月~2009年12月杭州市第一人民医院和慈溪市第二人民医院神经外科收治的高血压性基底节出血患者,共344例。对照组为同期杭州市第一人民医院健康体检者,共344例,年龄及性别均与脑出血病例配对。脑出血患者一般情况及临床资料详见表1。脑出血患者和对照组均除外既往脑卒中、使用抗凝剂、严重感染、严重心肝肾疾病及严重头部外伤史。
2.指标测定:脑出血患者和对照组静脉血在入院时或体检时获得。脑出血患者血标本立即放入无菌EDTA试管中,在4℃、1500r/min、离心20min收集血浆,储存在 -70℃环境中待检。ELISA法测定血浆抵抗素和C-反应蛋白浓度,试剂购于美国R&D systems公司。
3.抵抗素基因+299G>A位点多态性分析:使用美国Stratagene公司生产的DNA提取试剂盒提取脑出血患者及对照组外周血DNA,利用PCR-RFLP法分析抵抗素基因 +299G>A位点基因多态性。……
