刘海霞，郑婷，赵国芬，*，包秋华，张和平

（1.内蒙古农业大学生命科学学院，内蒙古呼和浩特010018；

2.内蒙古农业大学食品科学学院，内蒙古呼和浩特 010018）

近年来，共轭亚油酸由于其重要的生理功能受到人们的重视[1]，乳酸菌微生物合成共轭亚油酸是一种经济高效的途径[2]，而酸菜是世界性大众化蔬菜腌制品，在我国历史悠久[3]，其自然发酵的主要菌群是乳酸菌[4]。本实验从自然发酵的酸菜汁分离鉴定乳酸菌并用紫外法测定共轭亚油酸含量，并得到一株高产共轭亚油酸的菌株，为酸菜制品研究和共轭亚油酸工业化生产提供理论和实验参考。

1 材料与方法

1.1 材料

自然发酵的酸菜汁；牛肉膏、蛋白胨：广东环凯微生物科技有限公司；磷酸氢二钾：北京益利粗细化学品有限公司；无水乙酸钠：天津市永大化学试剂开发中心；柠檬酸铵：天津市凯通化学试剂有限公司；硫酸镁、硫酸锰：天津市科盟化工工贸有限公司；吐温80：广东环凯微生物科技有限公司；溴甲基酚紫培养基：上海博微生物科技有限公司；琼脂、亚油酸：美国sigma公司。

1.2 实验主要设备

PYX-DHS电热恒温培养箱：上海一恒科技有限公司；SW-CJ-1FD超净工作台：苏州安泰空气技术公司；LS-B50L高压蒸汽杀菌锅：上海医用核子厂；UV-1800PC紫外分光光度：计北京普析通用仪器有限责任公司；GS00001PCR 仪：Gene Technologies，Geldoc 2000凝胶成像系统：Bio－Rad Laboratories，核酸电泳仪：Power pac Bio－Rad Laboratories。

1.3 方法

1.3.1 乳酸菌的分离纯化

酸菜汁用无菌水梯度稀释，稀释度分别为10－1、10－2、10－3、10－4、10－5，各取 200 μL 倒入含溴甲基酚紫的平板培养皿中，用涂布棒将其涂匀，涂干；……