杨 朵，王占伟，郭 宇，张 正＊

（1.首都医科大学附属北京世纪坛医院 临床检验中心，北京 100038；2.北京大学人民医院 检验科，北京 100044）

临床分离肺炎克雷伯菌中整合酶基因的检测分析

杨 朵1，王占伟2，郭 宇2，张 正2＊

（1.首都医科大学附属北京世纪坛医院 临床检验中心，北京 100038；2.北京大学人民医院 检验科，北京 100044）

＊通讯作者

近年来肺炎克雷伯菌已成为医院感染的重要病原菌，同时院内分离的肺炎克雷伯菌往往有较高的产超广谱β－内酰胺酶（ESBL）率并呈现多重耐药性［1，2］。在肠杆菌科细菌耐药机制中，整合子起着非常重要的作用［3］，通过位点特异性基因重组机制使细菌耐药基因盒（gene cassette）整合在一起，形成多种耐药基因的组合和排列，导致不同耐药基因的水平传播。因此，研究整合子的流行状况对于了解一个地区耐药基因的传播状况具有重要的意义。

1 材料与方法

1.1 菌株

2006年1月－2006年12月北京大学人民医院临床标本分离的150株肺炎克雷伯细菌。标准菌株包括：大肠杆菌 ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853，肺炎克雷伯菌ATCC13883，肺炎克雷伯菌ATCC700603。

1.2 方法

1.2.1 细菌鉴定与药敏试验 全部菌株经VITEK 2初步鉴定并做药敏。是否产ESBL经双纸片确证法证实，不能经双纸片法确证的菌株经表型法进行证实［4］［用亚胺培南（IPM 10μg）、头孢吡肟（FEP 30μg）、头孢他啶／克拉维酸（CD02 30μg／10μg）、头孢噻肟／克拉维酸（CD03 30μg／10μg）、头孢噻肟（CTX 30μg）5种纸片进行筛选。判断标准：IPM表现为敏感，而FEP、CTX、CD02、CD03均耐药，提示待测菌株产ESBL的同时也产生其他β－内酰胺酶，如产AmpC酶］。

1.2.2 肺炎克雷伯菌质粒DNA的提取 采用北京赛百盛公司质粒快速提取试剂盒（碱裂解法）进行提取。……