胡志刚，刘 洁，叶 燕，陈国千，邹耀红，俞 蕾

（南京医科大学附属无锡市人民医院1.检验科；2.呼吸科；3.风湿科，江苏 无锡 214023）

抗心磷脂抗体（anticardiolipin antibody，ACA）是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体。ACA常见于系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病，与血栓形成、自然流产或宫内死胎关系密切［1－3］。在自身免疫反应过程中，ACA的变化以IgG为主［4］。目前对ACA的检测主要方法为酶联免疫分析法［3，5］。酶联免疫分析为大分子有活性的酶标记，在灵敏度、线性范围和稳定性方面有所欠缺，此外，测量精度也不够高［6，7］。建立灵敏、稳定、线性范围宽、便捷的 ACA检测方法有重要临床意义。本试验采用ACA抗原（心磷脂＋β2糖蛋白I）和Eu3＋标记的鼠抗人IgG抗体，建立稳定的高灵敏度的时间分辨荧光免疫（time-resolved fluoroimmunoassay，TRFIA）法检测人血清中的心磷脂抗体，报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂全自动TRFlA检测仪AutoDELFIA-1235为芬兰Perken公司产品；96孔微孔板、人重组β2糖蛋白I、心磷脂、ACA酶联免疫试剂盒、ACA-IgG抗体标准品为德国AESKU公司产品；鼠抗人IgG二抗由中国医学科学院基础科学研究所提供；Eu3＋标试剂和Eu3＋发光增强液购自EG＆G-Wallac公司；N2-［p－异氰酸－苄基］－二乙烯三胺四乙酸（DTTA）为Sigma公司产品；牛血清白蛋白（BSA）购自卫生部上海生物制品研究所；Sephadex-G25为美国Pharmacia公司产品；浓缩洗涤液、增强液及反应缓冲液由江苏省原子医学研究所提供。其他试剂均为国产分析纯。

1.2 固相抗原制备 将ACA抗原用50mmol／L Na2CO3－NaHCO3pH 9.6缓冲稀释制成包被液，96孔微孔板各孔加100μl，4℃包被过夜。弃去包被液，冲洗3次，每孔加250μl含3g／L BSA的上述缓冲液封闭，室温放置2h。……