县级结防机构开展结核杆菌检测方法探讨

2012-08-15贺瑜

中国实用医药 2012年7期

贺瑜

结核病仍是严重威胁人类健康的重大疾病之一，结核患者的细菌学检查不仅是发现传染源的主要途径和手段，也是结核病确诊和考核疗效的可靠标准。但是传统方法涂片镜检检出率低，培养法需时间长;提高痰菌阴性肺结核患者的诊断率并缩短确诊时间是结核病防治工作面临的主要问题，特别在县级结核病防治机构急需一种快速、准确、经济、易推广的结核分枝杆菌检测方法。

1 方法

目前主要实验诊断方法有涂片镜检法、LJ培养法、快速培养法、免疫法、分子生物法、噬菌体法。

1.1 涂片镜检法快速、便宜，但是检出率低，漏诊率高，无法鉴别死活菌。陈中秀，谢清波把痰标本先液化浓缩处理后涂片抗酸染色检查抗酸杆菌，明显提高抗酸杆菌阳性检出率［1］。杨华林，谭云洪报道液基夹层杯技术检测痰中抗酸杆菌，也是利用了离心集菌涂片的方法使涂片更均匀和痰标本阳性检出率提高［2］。

1.2 LJ培养法是结核菌检验的金标准但是检测周期超长:约8周;而且有一定比率假阳性，因各种分枝杆菌均能生长，需进一步鉴定。

1.3 快速培养检测法 BACTEC 960自动培养仪是目前国内外常用的分枝杆菌快速检测系统，有研究显示阳性标本检出时间最早是3～6 d［3］，该方法阳性率高，能快速检测分枝杆菌，灵敏度高，但是需要专用仪器，专用试剂，价格高，需进一步鉴定分枝杆菌种类。翁绳凤，刘威使用美国BD公司生产BACTECTMMicroMGITTM荧光判读器开展分枝杆菌快速检测，通过与罗氏法和BACTEC 960自动培养法的培养结果比较认为BACTECTMMicroMGITTM荧光判读器分枝杆菌快速检测法具有操作简单快捷，阳性率高，敏感性强且经济实用的特点［4］。

1.4 免疫学方法优点是快速;但是灵敏度低，有一定的假阳性和假阴性;特异性差;结果判断带有主观性;缺乏有效的质控手段。韩敏，乐军报道免疫层析法试剂盒快速鉴别结核与非结核分枝杆菌，特异性为100%;敏感性为98.9%;尤其在液体培养物鉴定方面具有优势，无需额外实验室设备［9］。

1.5 结核杆菌DNA扩增法-PCR 诊断肺结核具有快速、特异、敏感的特点，但是需要昂贵的仪器设备，检测成本较高，屠德华认为环介导等温核酸扩增(LAMP)技术具有快速、敏感和特异性高的优点［5］。

1.6 噬菌体法可检测痰液、胸水、腹水、脑脊液、尿、骨髓等多种标本，叶佳庆，熊国亮等采用噬菌体生物扩增法技术对196例结核标本进行检测，认为阳性率高于涂片和罗氏培养，该方法敏感性高、特异性强、操作简便，对结核病临床诊断有较高的应用价值［6］。也有文献报道该技术敏感性、特异性不够，且反应时间、温度、噬菌体活性、杀菌剂浓度和混匀情况等均可影响检测结果的准确性［7］。

1.7 目前其他新诊断技术如超亮发光二极管(LED)荧光显微镜，价格较低，可提高敏感性，缩短镜检时间［5，8］。