蛹虫草提取物对人结肠癌细胞SW111C抑制作用的研究
2012-08-13纪朋艳姜艳霞
纪朋艳,罗 速,姜艳霞
(1.吉林医药学院医学实验中心,吉林 132013;2.北华大学,吉林 132013)
蛹虫草又名北冬虫夏草、北虫草、蛹草等,与名贵中药冬虫夏草为同属真菌植物。《全国中草药汇编》记载:“蛹虫草(北虫草)的子实体及虫体也可作为冬虫夏草入药”[1]。由于冬虫夏草在自然条件下不能长期保存,加之近年来环境条件日益受到破坏和无限的人工采集,虫草资源越来越贫乏。而目前人工栽培蛹虫草已获成功[2-5],因此,对其有效成分的研究、开发具有更深的意义。国内外关于蛹虫草提取物(RW)对结肠癌细胞的作用及机制鲜有报道。本研究通过体外实验初步探讨RW对人结肠癌细胞株SW111C的作用,为其作为一种抗癌药物或防癌保健药应用于临床提供一定的实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞 结肠癌细胞株SW111C购自吉林省肿瘤研究所。用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养于37℃、5%CO2的恒温培养箱中。
1.1.2 药物与试剂 RW(由北华大学崔新颖教授所赠)用无菌二甲基亚砜(DMSO)助溶,其中DMSO的浓度小于0.1%。DMEM(低糖)培养基购自GIBCO公司,四甲基耦氮唑蓝(MTT)购自 Genview公司,台盼蓝购自Sigma公司,凋亡DNA Ladder提取试剂盒购自北京普利莱基因技术有限公司。
1.1.3 仪器与设备 流式细胞仪(Beckman Coulter Epics XL)、二氧化碳培养箱(日本平泽制作所)、倒置显微镜(Olympus)、低温超速离心机(Eppendorf 5417R型)、酶联免疫检测仪(南京华标仪器厂)等。
1.2 实验方法
1.2.1 MTT法观察RW对SW111C细胞增殖的抑制作用细胞以每孔5×103个,体积200μL接种于96孔板,37℃、5%CO2温箱内培养24h。吸弃培养液,实验组分别用浓度为2、4、8、16、32mg/L的RW 药液200μL处理;阴性对照组加入完全培养液200μL;……
