綦晓龙，陈川宁，徐 亮，吴晓霞

（泸州医学院:1.附属医院普外科；2.生物化学及医学分子生物学教研室，四川 泸州 646000）

树突状细胞（dendritic cells，DCs）被认为是目前发现的机体内功能最强大的抗原提呈细胞（antigen presenting cells，APC）。DCs能有效地激活、诱导初始T细胞，引发机体的免疫应答或免疫耐受，在免疫耐受和免疫调节中的作用日益受到广泛关注。近年来，随着移植免疫反应机制研究的逐步深入，人们发现DCs的成熟状态是机体诱导移植排斥反应或诱导移植耐受的关键环节［1］，通过DCs诱导耐受是延长移植物存活的有效方法。研究发现，ω－3PUFAs可使大鼠DCs的CD40、CD80、CD86及MHCⅡ等表型明显下调，其抗原提呈功能也受到明显影响［2］。在临床实践中发现，ω－3PUFAs对类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎等多种自身免疫性疾病具有一定的治疗作用，可以缓解上述疾病的病程进展［3－4］，提示其可能与自体免疫反应的抑制有关。本研究在体外以二十二碳六烯酸（DHA）处理DCs，观察其对DCs细胞形态、免疫表型及细胞因子释放的影响。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 RPMI－1640购自Gibco公司；人淋巴细胞分离液（Ficoll）购自天津灏洋生物制品科技有限公司；rhGMCSF及rhIL－4购自美国Peprotech公司；DHA、饱和脂肪酸（SA）及内毒素脂多糖（LPS）购自美国Sigma公司；逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）试剂盒购自BioBRK公司；ELISA试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司；Wright－Giemsa染液购自南京建成生物科技有限公司；FITC标记CD80、CD86及HLA－DR单克隆抗体购自美国Sigma公司。

表1 引物序列及扩增产物

1.2 方法

1.2.1 DCs的诱导及培养 取健康成人外周血40mL，用肝素抗凝，淋巴细胞分离液（Ficoll）密度梯度离心法分离出单个核细胞（PBMC），D－Hank′s液洗涤，用含10%胎牛血清 RPMI－1640培养液悬浮细胞，接种。……