(天津博纳艾杰尔科技有限公司，天津300462)

氨基酸对动物的生长、神经系统的发育及动物体内营养物质的正常代谢都有重要的作用，而且蛋白质是动物生长必需的营养物质，是评价饲料营养成分的一个指标，而氨基酸是构成蛋白质的基本单位，所以氨基酸的种类和含量也就是评价饲料质量的根本依据，从而准确检测氨基酸的含量和种类具有重要意义。柱后衍生的方法，虽然准确性高，但是耗时长、灵敏度低，所以本文采用柱前衍生的方法以缩短分析时间，增加灵敏度。同时该方法得到的氨基酸衍生物在-20℃可保存数月，克服了柱前衍生法衍生物不稳定的缺点，另外该方法准确性高，用标准品做未知样品进行检测，检测的含量与标准品的标示值非常接近。

1 材料与方法

1.1 实验材料与主要仪器

饲料样品1与样品2为市售两种不同品牌的饲料；Venusil AA氨基酸分析方法包(含衍生试剂PITC、氨基酸标准品、Venusil AA氨基酸分析专用柱4.6 mm×250 mm，5 μm)购自天津博纳艾杰尔科技有限公司；氨基酸标准品(sigma公司)；水(屈臣氏4 L纯净水)、乙腈(色谱纯，霍尼韦尔)；Agilent 1100高效液相色谱仪(包括紫外可变波长检测器和高压输液泵)。

1.2 样品前处理

酸水解法：准确称取一定量的样品，使样品氨基酸总量在50～75mg范围内，置于20～30 ml安瓿瓶中，加入10 ml含0.1%苯酚的6 mol/l盐酸，振摇使样品溶解或者是样品均匀分散在溶液中，将安瓿瓶置于-20℃冰箱中冷冻3～5 min，充氮后用喷灯熔封，然后置于(110±1)℃烘箱中水解24 h，取出冷却，取水溶液1 ml，置于浓缩管中用浓缩仪浓缩至干，加入1 ml的0.1 mol/l稀盐酸溶解，用0.45 μm滤膜过滤后，取上清液贮存于冰箱中，供衍生使用。……