张 涛，尹庆水，夏 虹，张 余，李 梅，杨小明，蓝国波

镁合金是一种新型可降解金属材料，具有良好的降解性和生物相容性[1]，但其降解速度较快，临床应用受到一定限制。微弧氧化（microarc oxidation，MAO）处理可使镁合金表面形成粗糙面，有利于成骨细胞吸附，耐蚀性能也明显改善[2-3]。本研究试图通过观察MAO镁合金、镁合金、钛合金对骨骼肌细胞黏附及增殖影响的比较研究，以评价MAO镁合金材料的生物相容性。

1 材料与方法

1.1 实验动物

日本大耳兔3只，体质量2.0～2.5 kg，雌雄不限，购于广东省医学实验动物中心。

1.2 主要试剂和试件材料

DMEM培养基、PBS、胎牛血清和胰蛋白酶（美国Hyclone公司）；碘化丙啶染色剂（江苏碧云天公司）；CCK-8（日本同仁公司）；庆大霉素（广东邦民制药厂有限公司）。医用钛合金、镁合金AZ31B均由中科院金属研究所提供，规格均为直径10 mm、厚3 mm圆片状。

1.3 实验分组及处理

根据材料试件的不同分为3组：（1）对照组：采用医用钛合金，磨平抛光后，丙酮和无水乙醇超声清洗，消毒后待用；（2）镁合金组：采用镁合金AZ31B，磨平抛光后，丙酮和无水乙醇超声清洗，消毒后待用；（3）MAO组：采用镁合金AZ31B，磨平抛光后，丙酮和无水乙醇超声清洗，进而采用MAO技术（表面打磨平整、脱脂处理、中和、水洗、SIMOXIDE微弧氧化、水洗、干燥、封闭处理[2]），处理后得到MAO镁合金，消毒待用。

1.4 兔骨骼肌细胞培养

无菌条件下取兔臀部肌肉1 cm3，置于冷D-Hank液中，加入104U/L庆大霉素反复冲洗，去除结缔组织，保留肌肉组织，剪成1 mm3左右的小块，按照组织块法[4]置于培养瓶中贴附，加入含10%胎牛血清的DMEM培养基，于37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养，2～3 d换液1次，细胞长至80%融合时进行传代。……