黄 英

（云南省丽江市食品药品检验所，云南 丽江 674100）

根据《中国药典》2010年版规定，在进行药品微生物限度检查时，应对所用方法进行验证，以确认所采用的方法适合于该药品的微生物限度检查［1］。有些中成药含有较强的抑菌成分，由于抑菌成分的干扰，采用常规法进行微生物限度检查，其结果不能真实反映其污染的微生物的状况。为使检测结果科学、准确，检测前应进行方法学验证。本文通过对乙肝清热解毒片等中成药进行方法学验证试验，结果表明：对具有抑菌作用的中成药，其抑菌作用的强弱不同，进行微生物限度检查时，要消除其抑菌活性所采用的方法也不同。

1 试验材料

1.1 菌种 枯草杆菌［CMCC（B）63501］、金黄色葡萄球菌［CMCC（B）26003］、大肠埃希菌［CMCC（B）44102］、白色念珠菌［CMCC（F）98001］、黑曲霉［CMCC（F）98003］均由云南省食品药品检验所提供。

1.2 培养基 营养琼脂、玫瑰红钠琼脂、营养肉汤、改良马丁、改良马丁琼脂，MUG、麦康凯琼脂、胆盐乳糖、乳糖胆盐发酵培养基为北京三药科技开发公司和北京牛牛基因技术有限公司生产。按规定进行培养基的适用性检查为合格。稀释剂为pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液。

1.3 样品 乙肝清热解毒片等中成药共12个品种见表1。

2 方法与结果

按《中国药典》2010年版微生物限度检查法［1］进行验证。

2.1 菌液制备

2.1.1 取经30～35℃培养18～24h的金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠埃希菌的营养肉汤培养物1mL，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至10－5～10－7，使成50～100cfu·mL－1，经活菌计数后备用。

2.1.2 取经23～28℃ 培养24～48h的白色念珠菌的改良马丁液体培养物1mL，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至10－5～10－6，使成50～100cfu·mL－1，经活菌计数后备用。……