陈 鹏，王志萍，李 文，胡明道

（昆明医科大学第二附属医院，云南 昆明 650101）

原发性肝癌是我国男、女性因恶性肿瘤致死的第二和三位原因，五年生存率仅5%左右。究其原因，一是很多肝癌病人在诊断后肿瘤已不能切除；此外肝癌切除术后的转移复发率高达60～80%。但目前尚缺少一种有效的方法预防肝癌术后复发转移，肝细胞癌对大多数抗癌药物敏感性差，传统的化疗药物毒副作用大，疗效不理想。因此寻找一种低毒副作用药物能抑制肝癌术后复发转移显得很有意义。三七总皂苷是中药三七的主要药物成分，具有低毒副作用的特点，本文应用不同浓度三七总皂苷作用于高转移性的人肝细胞肝癌细胞系HCCLM3，观察对肝癌高转移细胞增殖和形态的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株 高转移性的人肝细胞肝癌细胞系HCCLM3购买于复旦大学附属中山医院肝癌研究所。

1.1.2 药物及试剂 三七总皂苷（从五加科人参属多年生草本植物三七中提取的有效成分）购自昆明制药集团股份有限公司，二苯基四氮唑溴盐（MTT）为美国sigma公司产品，二甲基亚砜（DMSO）为美国Sigma公司产品。

1.2 方法

1.2.1 细胞的培养 HCCLM3细胞用含15%新生胎牛血清的高糖DMEM完全培养基于37℃、5%CO2、混合气体的孵箱（95%饱和湿度）内培养。每2天换液1次。细胞单层贴壁生长，待长满瓶底时，用胰蛋白酶消化液消化成单个细胞，继续传代。

1.2.2 MTT法测定细胞存活率 取对数生长期细胞，以4×103个／孔浓度接种于96孔板，每孔含100μl细胞悬液。每组设3个平行孔，并设空白对照。……