5b对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7ADR的耐药逆转作用
2012-07-30郭荣赵瑛
郭 荣 赵 瑛
山西医科大学第一医院医院普通外科,山西太原 030001
临床上,乳腺癌是一种女性常见的疾病,且发病率有逐年上升的趋势。乳腺癌细胞中存在大量的多药耐药细胞株(MDR),MDR能显著降低化疗药物的敏感性,影响化疗的治疗效果[1]。板蓝根是菘蓝的根,其提取出来的活性物质具有较强的免疫激活功能,能显著增强化疗药物阿霉素等的敏感性,增加化疗药物在癌细胞中的蓄积,提高药效,而且其对细胞的毒副作用小。本文主要研究板蓝根提取物5 b对乳腺癌耐药细胞株MCF-7ADR的耐药逆转作用及逆转机理,为乳腺癌的治疗提供依据。
1 仪器及细胞株
1.1 仪器来源
活性单体-5 b为天津中医药大学提供,主要采用溶剂浸提法从中药板蓝根中分离提纯获得,纯度高达98%。阿霉素及碘化吡啶由北京中山医药公司提供;1640细胞培养基、流式细胞仪由上海明治公司提供;CO2培养箱及显微镜由北京生物公司提供。
1.2 细胞株来源
人乳腺癌细胞株MCF-7及其耐药细胞株MCF-7/ADR由中山肿瘤医院实验室提供,MCF-7/ADR细胞株的耐药倍数是MCF-7细胞株的80倍。
2 实验方法
2.1 细胞培养
MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞采用DMEM培养液在1640细胞培养基中培养,培养液中有100U/mL的链霉素、100U/mL的青霉素、12%的小牛血清;培养环境中有5%的CO2、保持在37℃左右、湿度适宜,2d进行一次传代。
2.2 MTT法检测[2]
本研究采用MTT法检测活性单体-5 b对 MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞生长的安全浓度,并观察MCF-7/ADR的多药耐药细胞株MDR生长的抑制功能及逆转作用。耐药倍数及逆转倍数根据以下公式确定:耐药倍数=IC50(MCF-7/ADR细胞株)/IC50(MCF-7细胞株),本研究中MCF-7/ADR细胞株的耐药倍数是MCF-7细胞株的80倍;……
