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胎传梅毒的3种血清学检测方法比较分析

2012-07-30

中国卫生产业 2012年23期
关键词:螺旋体梅毒抗原

张 丹

湖南省长沙市省儿童医院皮肤科,湖南长沙 410000

胎传梅毒(Congenital syphilis,CS)又称先天梅毒,是梅毒螺旋体经由母体胎盘进入胎儿血循环使胎儿受染而引起的新生儿、婴儿和儿童梅毒[1]。为了及时落实干预措施,对其进行早期诊断十分重要。目前在胎传梅毒的诊断中,主要是以临床症状和血清学结合的方法来进行判别。因此,探索早期、敏感和特异的实验室诊断策略就十分必要。本研究采用甲苯胺红不加热血清反应素试验(Toluidine red unheated serum test,TRUST)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(T.pallidum particle agglutination,TPPA)和梅毒螺旋体免疫吸附试验 (T.pallidum enzyme- linked i mmunosorbent assay,TPELISA)3种技术,对157例胎传梅毒患儿血清进行检测,现将比较结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

该院2009年1月—2011年8月共诊断出157例胎传梅毒患儿,诊断符合《中国疾病预防控制中心统一性病诊断标准》。其中年龄最小1d,最大3月,男性92例,女性65例。

1.2 试剂和方法

非特异性梅毒螺旋体抗原血清试验采用上海荣盛生物技术有限公司生产的TRUST试剂盒,特异性梅毒螺旋体抗原血清试验借助日本富士瑞必欧株氏会社生产的TPPA试剂盒用被动血凝法检测,以及上海科华生物工程股份公司生产的TP-IgMELISA试剂盒检测IgM。所用试剂都在有效期内,严格按照各试剂的说明书规范操作。

1.3 仪器

酶标仪为 Bio-Rad MODEL680, 洗板机为 Bio-Rad MODEL1575,恒温孵箱为广州深华公司的GSP-9050MBE隔水式电热恒温培养箱。

1.4 统计学分析

采用SPSS 17.0统计软件进行,不同方法间的差异比较采用McNemar非参数检验,检验水准α取0.05。

2 结果

所有样本TPPA检测均为阳性,3种血清学检测全部为阳性者 93例。TRUST阳性检出率为 59.24%, 与 TPPA、TP-IgMELISA检测结果有明显差异,且差异有统计学意义(P<0.05)。而TP-IgM-ELISA和 TPPA2组方法检测结果的符合率为 98.09%(154/157),其检测结果间的差异无统计学意义(P>0.05)。

表1 157例梅毒抗体阳性者TRUST、TPPA和TP-IgM-ELISA检测结果

3 讨论

从抗原抗体反应原理上看,现阶段广泛用于实际工作中的梅毒血清学检测手段主要分为非梅毒螺旋体抗原血清试验和梅毒螺旋体抗原血清试验2组。非梅毒螺旋体抗原血清试验检测的是由螺旋菌诱导胞膜损伤产生的抗磷脂抗体(即反应素)。此类试验操作简单,成本低,是监测疗效的唯一推荐试验。但由于抗磷脂抗体为非特异性抗体,存在假阳性问题,受检样本的抗体浓度过高,也可能存在前带反应即假阴性问题[2]。TRUST试验就是其中一种,实际操作中在白色卡片上判读红色凝块的阳性结果比较容易,操作简便、快捷,文献报道其检出率和重复性强于快速血浆反应素试验(RPR)。本研究中TRUST的阳性检出率为59.24%,漏检率可见一斑。梅毒螺旋体抗原血清试验是用梅毒螺旋体或其成分做抗原来检测样本中的抗螺旋体抗体,具有较高的敏感性和特异性。应用此类方法检测到抗梅毒螺旋体抗体表明受检者曾有暴露,但阳性结果并不能反应受检者治疗情况,因此尚不能用于治疗效果的评价。TPPA和TP-IgM-ELISA即属此类。TPPA是将特异性梅毒螺旋体抗原包被在明胶颗粒上,以排除非特异性反应,有较高敏感性和特异性。本研究结果显示TPPA的阳性检测率为100%,提示其敏感性好,且目前已被参比实验室用于确认实验,其特异性达到98%~100%[3],较之具有同等敏感性荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS),成本相对较低,操作简单。但在实践中发现,该方法所需试剂价格较贵,结果判读不能自动化,依赖于肉眼观察,不适合应用于大规模的样本检测。TP-IgM-ELISA借助了酶放大系统,使其敏感性并不低于TPPA,本研究结果证实了二者的符合率高达98.09%,且差异不具统计学意义(P>0.05)。而且此法检测的是血清TP-IgM水平,IgM相对分子量大,不能通过胎盘屏障,从理论上讲,妊娠末3个月的胎儿如感染梅毒螺旋体,即可主动合成针对病原菌的IgM抗体。因此,此法不但可作为梅毒活动性感染的的监测,且尤其适合早期胎传梅毒的诊断。

综上,本研究证实了TP-IgM-ELISA具有较高的诊断符合率,且操作便于标准化控制,实验试剂相对低廉,可以取代TRUST和TPPA作为胎传梅毒的首选血清学诊断方法。

[1]陈祥生.该国梅毒流行现状及防治策略[J].国际流行病学传染病学杂志,2008,35(2):73-77.

[2]黄志明,周佳慧,罗荣华,等.妊娠梅毒 TRUST滴度及产前干预对先天梅毒发病的影响[J].中国热带医学,2009,8(9):1408-1410.

[3]陈祥生.该国梅毒流行现状及防治策略[J].国际流行病学传染病学杂志,2008,35(2):73-77.

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