王荣江 石麒麟 邵四海

(湖州市第一人民医院,浙江 湖州 313000)

膀胱癌是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤,血管生成是肿瘤产生、发展、转移过程中极为关键的步骤,细胞增殖状况是预测膀胱癌发展及预后的良好指标之一。微血管密度(MVD)可用来评价肿瘤组织微血管生成情况,核增殖相关抗原Ki-67可反映肿瘤细胞的增殖程度。本研究采用免疫组化SP法检测膀胱癌组织中Ki-67和MVD的表达,探讨对膀胱癌的生物学行为的影响及预后意义,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本组30例(膀胱癌组),男22例,女8例,年龄60～78岁,平均(65.4±4.8)岁。按UICC分期标准∶浅表性癌组9例(Tis期1例,Ta期2例,T1期6例),浸润性癌组21例(T2期11例,T3期9例,T4期1例)。根据WHO级标准∶G1期9例,G2期13例,G3期8例。单发23例,多发 7例；术前初发22例,复发8例；术后复发5例,未复发25例。术后病理证实单纯移行细胞癌27例,移行细胞癌合并腺癌2例、合并鳞癌1例。选择同期20例正常膀胱黏膜标本作为对照组。

1.2 标本制备与免疫组化方法 30例膀胱癌患者肿瘤标本常规经4%甲醛固定,石蜡包埋,制成4μ m切片,应用SP免疫组化法进行组织染色,试剂盒购于福州迈新生物技术开发有限公司,按照试剂盒说明操作,使用鼠抗人Ki-67单克隆抗体、鼠抗人F-ⅧRag单克隆抗体对所选切片进行染色,磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照。

1.3 免疫组化结果判定标准 (1)Ki-67表达测定∶参照Volm Metal[1]的评判标准,以肿瘤细胞膜或细胞核有棕色颗粒着色为阳性标记,以随意5个400倍视野的癌巢区阳性细胞数占肿瘤细胞＜5%定为阴性(-),6%～20%为弱阳性(+),21%～30%为阳性(++),＞30%为强阳性(+++)；……