血浆基质金属蛋白酶-2,9与CABG患者心功能NYHA分级的相关性研究
2012-07-21陕西省人民医院急诊内科西安710068陈新军刘洁琳温绍君
陕西省人民医院急诊内科(西安710068) 陈新军 刘洁琳 温绍君
基质金属蛋白酶(MMPs)是一类锌离子依赖性蛋白水解酶,可降解心肌细胞外基质(ECM),为心力衰竭的发展提供必要条件。基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)又称胶原酶,作用底物为细胞外基质的主要成分Ⅳ型胶原纤维组织,因此在心力衰竭过程中起着重要作用[1]。我们利用明胶酶谱分析法测定了缺血性心脏病行冠脉搭桥术(CABG)患者,血浆 MMP-2,MMP-9的相对活性,并对胶原酶的活性表达水平和不同等级的心脏功能进行分析,旨在探讨其在心力衰竭的心脏分子标记物中的临床意义。
资料与方法
1 一般资料 随机选取缺血性心脏病患者247例为观察组,男129例,女118例,平均年龄55.1±6.9岁。排除标准:合并有糖尿病,缺血性脑病和严重炎症,结核病以及肿瘤的患者。心功能分级(NYHA):Ⅰ级49例,Ⅱ级86例,Ⅲ级75例,Ⅳ级37例。同期选取健康体检的心脏功能正常的健康人群214例作为对照组,男108例,女106例,平均年龄54.9±6.3岁。两组一般资料比较无统计学意义。
2 方 法 观察组患者术前抽取静脉血4 ml,对照组查体时抽取静脉血4 ml。置入肝素化的试管,在4℃,3000 r/min的转速下离心15 min,分离上清血浆,分装于Eff endorf管中并保存在-80℃冰箱中。电泳前取血浆样品4μl与Tris缓冲液16μl和等体积的上样缓冲液混匀。血浆样品蛋白定量采用Bradf or d法[2]。使用明胶酶谱试剂盒(普利莱基因技术有限公司),以酶谱法[3]测定基质金属蛋白酶的含量。制备含1 mg/ml明胶的10%聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)。取5μl上样进行SDS-PAGE电泳,加样后于120 V直流电下电泳,到分离胶后,恒定电压160 V电泳直到溴酚蓝染料到达凝胶底部。……
