韩 豪，李新生，2，3，高 玥，刘 新，杨智勇，马娇燕

(1.陕西理工学院，2.陕西省资源生物重点实验室，3.陕西省黑色有机食品工程技术研究中心，陕西 汉中723000)

B族维生素是一类水溶性物质，主要包括硫胺素(维生素 B1，VB1)，核黄素(维生素 B2，VB2)和吡哆素(维生素B6，VB6)等。VB1具有醛基转移和α-酮酸的脱羧作用，缺少它会得脚气病、神经性皮炎等。VB2在生物体内起传递氢的作用，缺少时易患口腔炎、皮炎、微血管增生等。VB6是氨基酸转氨基、脱羧作用，是合成神经递质的必需品［1-2］。

目前B族维生素的检测方法很多，我国食品卫生标准分析方法中对VB1采用荧光法，药典中对VB1、VB6采用分光光度法［3］，国际上通用的关于 B族维生素的检测方法大多为20多年前建立的微生物法［4］。这些方法仅能测定其中的单一组分，且步骤烦琐，对于某些食物样品，还要用专门的萃取方法除去干扰物后才能测定。近年来国内外学者对多种B族维生素的同时测定进行了大量研究，建立了许多分析方法，如高效毛细管电泳法［5-6］和高效液相色谱法［7-12］。本研究建立了超高效液相-三重四极杆串联质谱(UPLC-MS/MS)法，高效快速检测 VB1、VB2和VB6的含量。

1 材料

5个黑小麦样品 YK-1、YK-2、YK-3、YK-5 和YK-6，由西北农林科技大学提供。

VB1(含量98%)、VB2(含量98%)和VB6(含量100%)对照品，购于天津一方科技有限公司;乙腈、甲醇、甲酸均为色谱纯。

UPLC-MS/MS联用仪，配电喷雾离子源(ESI)，美国Waters公司;LC-800离心机，科大创新股份有限公司;SK-120E超声波清洗机，宁波科生仪器厂。

2 方法

2.1 色谱条件

色谱柱:ACQUITY UPLC BEH C18柱(2.1 mm ×50 mm，1.7 μm);柱温:35 ℃;进样量:10 μL。流动相:A相为乙腈，B相为0.1%甲酸溶液，采用梯度洗脱:A 相 0～4.0 min由 95%变为 20%、4.0～7.0 min由20%变为80%、7.0～8.0 min由80%变为95%;流速:0.3 mL/min;分析运行时间8 min。……